酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結合。博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構建及篩選的工作。吉林應用酵母文庫做什么
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉化試劑啦~該系列產品,經歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復配制試劑、重復做實驗、不停的花費時間驗證而頭禿了。遼寧品質酵母文庫報價酵母雙雜實驗過程中如何選擇核體系或者膜體系? 。
酵母雙雜交技術,自創(chuàng)建以來被廣泛應用于蛋白互作研究領域,在生命科學的基礎探秘研究中起著重要作用。然而該技術設計初衷,*是斯坦利先生為了完成申請學校經費的目的。該技術設計巧妙,它的許多優(yōu)點在設計之初并未顯現(xiàn),反而在這么多年的高頻使用和進一步開發(fā)利用過程中越發(fā)明顯。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)盡管酵母雜交技術揭示了蛋白質結合位點的詳細信息,但操作簡單。只需2個質粒+1個菌株即可完成,且有不同體系方便選擇。(2)該技術利用比較好的DNA結合位點,有效的***結構域和友好的報告基因系統(tǒng),可以放大弱互作的信號。(3)該技術可用于各種物種的蛋白互作檢測,具有物種普適性,尤其是人類蛋白。(4)衍生技術具有更***的應用,可擴展到檢測蛋白質與DNA、蛋白質與RNA、蛋白質與小分子以及其他組合之間的相互作用,甚至可實現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關聯(lián)。當然,做過酵母雜交實驗的小伙伴應該都了解,互作結果的判斷,往往要等酵母生長好幾天才能看出來(當然,小歐認為這在偉大的科研事業(yè)過程中算不上啥),互作強弱也是主觀判斷性較強,存在假陽性。
酵母雙雜交實驗表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(圖 D-E)。為進一步研究在年齡信號調控中的作用機制,分別構建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時相轉換(圖A),證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結構過早終止,表明PtMADS11在開花調節(jié)和花序內分生組織命運起到調控作用。在擬南芥中利用年齡調控通路不同節(jié)點關鍵基因突變體進行功能互補實驗,結果顯示過表達PtDAL1可以恢復由于過表達miR156導致的開花延遲,但ft缺失會導致PtDAL1失活,PtDAL1過表達也不能恢復soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復由過表達miR156或ft缺失導致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調控不依賴于miR156或FT。2酵母展示質量技術酵母展示技術,共收錄30多個行業(yè),涵蓋多行業(yè)資料一鍵下載。
根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結構的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經多有報道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。報道了小麥 TaSRL1 轉錄因子調控根長的分子機制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。從小麥基因組中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 顯示 TaSRL1 主要在小麥苗期的根中表達。對 TaSRL1 啟動子序列進行預測分析。酵母文庫產品線由7個實驗室組成,分別有RNA抽提室,RNA質檢室、酵母建庫室、篩庫室等。河北酵母文庫報價
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酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調節(jié)提供了新見解。吉林應用酵母文庫做什么
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