酵母文庫:首先我們需要了解什么是"酵母雙雜交技術(shù)"?酵母雙雜交是一種研究真核細胞體內(nèi)蛋白質(zhì)之間相互作用的有效分子生物學技術(shù),在功能基因組學和蛋白質(zhì)組學研究中發(fā)揮重要作用。酵母文庫產(chǎn)品線由7個**實驗室組成,分別有RNA抽提室,RNA質(zhì)檢室、酵母建庫室、大腸桿菌轉(zhuǎn)化室,酵母菌轉(zhuǎn)化室、篩庫室等。使用原裝試劑盒、培養(yǎng)基,保證實驗質(zhì)量。實驗流程細致謹慎,實驗團隊經(jīng)驗豐富。實驗中使用RIN值7以上的RNA,一次建庫服務(wù),多次質(zhì)檢實驗,確保實驗數(shù)據(jù)高效準確。酵母膜系統(tǒng)文庫構(gòu)建與篩選技術(shù)。天津生物技術(shù)酵母文庫做什么
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協(xié)助完成。近日,上海交通大學/復(fù)旦-交大-諾丁漢植物生物技術(shù)研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist(IF:8.512)發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文,揭示了青蒿轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號所介導(dǎo)的青蒿素生物合成調(diào)控的新型分子機制,本研究通過藍/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達。云南歐易生物酵母文庫報價酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。
酵母單雜交篩選:(4)在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,***GL1促進HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細胞中***表達,并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中顯示HEK293T細胞中,***GL1過表達后,與LTR連接的螢火素酶表達上升近2倍,說明***GL1是一個轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是,文章的背景介紹內(nèi)容中,對應(yīng)用其他技術(shù)(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)對HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解,但并沒有直接評估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)(如Chip-seq、motif預(yù)測)進行了比較分析,發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對已識別因子的驗證率為30-60%,同等或優(yōu)于其他技術(shù)。
酵母文庫實驗:本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。酵母文庫篩選做文庫篩選前,首先需要檢測你的誘餌的自***活性和對酵母的毒性。
酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月,山東農(nóng)業(yè)大學郝玉金教授為通訊作者,在 Plant Physiology 雜志(IF: 6.902)在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文,深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長調(diào)控分子機制。氮素是植物生長發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)之一,硝酸鹽是植物根系吸收無機氮的主要形式。除了營養(yǎng)功能,硝酸鹽還可以通過多種信號途徑來調(diào)節(jié)植物生長和發(fā)育過程。赤霉素(gibberellin,GA)是一種植物***,同樣可以調(diào)控植物生長發(fā)育過程。然而,硝酸鹽和赤霉素信號通路如何共同調(diào)節(jié)植物生長的確切分子機制仍知之甚少。酵母文庫酵母單雜交篩庫科技研究雙文庫高校外包平臺。重慶品質(zhì)酵母文庫報價
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小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展,如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù),實現(xiàn)了文庫篩文庫可能,該技術(shù)通過對酵母雙雜常用載體的改造,并結(jié)合高通量測序,可直接獲得AD-BD互作蛋白對。所用方法相當巧妙,感興趣的同學請點擊《當酵母雙雜交遇到高通量測序》。鈕老師團隊之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標記基因,在油松從營養(yǎng)生長到生殖生長的時相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動針葉樹的發(fā)育,闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團隊利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測序技術(shù),優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù),與傳統(tǒng)的篩選測序相比,大幅度節(jié)省了時間和實驗成本。天津生物技術(shù)酵母文庫做什么
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