酵母文庫:2021年11月,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院張振魯團(tuán)隊(duì)在MolecularPlantPathology(IF:5.663)發(fā)表了題為“Nitrate-inducibleMdBT2actsasarestrictionfactortolimitapplenecroticmosaicvirusgenomereplicationinMalusdomestica”的研究論文,報(bào)道了MdBT2蛋白在抑制病毒ApNMV基因組RNA復(fù)制中的作用。文章中所用酵母文庫為歐易生物構(gòu)建。ApNMV與ApMV相似,含有3種正義單鏈基因組RNAs:RNA1(編碼1a蛋白,后面你會(huì)經(jīng)??吹剿瑢Σ《緩?fù)制至關(guān)重要),RNA2(編碼RNA聚合酶)和RNA3(編碼MP),以及在3種RNA中排名第4的RNA4(編碼CP)。當(dāng)然蘋果如何抵抗ApNMV的研究機(jī)制就更少了。酵母文庫酵母單雜交篩庫科技研究雙文庫高校外包平臺。酵母文庫多少錢
酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)(圖 D-E)。為進(jìn)一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機(jī)制,分別構(gòu)建了過表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換(圖A),證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止,表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示過表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達(dá)miR156導(dǎo)致的開花延遲,但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活,PtDAL1過表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。生物技術(shù)酵母文庫質(zhì)量酵母文庫構(gòu)建方法酵母篩庫構(gòu)建酵母文庫的意義。
酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn):為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn),從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實(shí)驗(yàn)做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會(huì)懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗(yàn)證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實(shí)驗(yàn)室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價(jià)廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實(shí)驗(yàn)、不停的花費(fèi)時(shí)間驗(yàn)證而頭禿了。酵母雙雜交文庫構(gòu)建實(shí)驗(yàn)流程。
酵母雙雜交、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實(shí)驗(yàn)顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)顯示,藍(lán)光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強(qiáng)。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。酵母三雜交酵母文庫數(shù)據(jù)庫。生物技術(shù)酵母文庫質(zhì)量
酵母文庫雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。酵母文庫多少錢
酵母文庫實(shí)驗(yàn):本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí),MdBT2 可以與一個(gè) DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。酵母文庫多少錢
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