歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物，通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負向調(diào)節(jié)JA信號?；ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物，可充當(dāng)抗氧化劑，幫助***活性氧和對**老，對人類健康具有重要價值。已有研究表明，花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中，蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成，但其分子機制仍有待深入研究。酵母文庫雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。技術(shù)酵母文庫多少錢
根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF（ETHYLENERESPONSIVEFACTOR）是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一，與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道，但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。從小麥基因組中克隆了 TaSRL1 基因，RT-PCR 顯示 TaSRL1 主要在小麥苗期的根中表達。對 TaSRL1 啟動子序列進行預(yù)測分析。上海運用酵母文庫歐易生物21天極速建庫，一個文庫可以同時做單雜、雙雜、三雜，化藥小分子篩選。
酵母文庫實驗實驗表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合，可以干擾其與 MdMYB9 的互作，進而負向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究 JA 對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。本研究鑒定了一個可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實驗表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。
酵母單雜交結(jié)果顯示，磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個目標(biāo)啟動子中的25個，包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達（圖A）。對叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動子序列預(yù)測分析顯示，有78個轉(zhuǎn)錄因子被富集，87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控，其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個關(guān)鍵調(diào)控樞紐（圖A-B）。EMSA和熒光素酶報告實驗證實，OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動子序列（圖C-F），并且這種結(jié)合依賴于啟動子中的P1BS元件（圖G）。酵母文庫酵母雙雜交篩庫個性化定制研究方案。
通過酵母雙雜交進行篩選，結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣，酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍光下與 SWC6 相互作用（圖 D）。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 E-L）證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復(fù)合物亞基，負責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 A-H）顯示，CRY1、CRY2 可以藍光依賴性與 ARP6 結(jié)合。10年酵母雙雜交建庫篩庫經(jīng)驗結(jié)合SMART和GATEWAY建庫技術(shù)優(yōu)勢。江蘇技術(shù)酵母文庫做什么
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酵母雙雜交實驗表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實（圖 D-E）。為進一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機制，分別構(gòu)建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比，過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時相轉(zhuǎn)換（圖A），證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止，表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點關(guān)鍵基因突變體進行功能互補實驗，結(jié)果顯示過表達PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達miR156導(dǎo)致的開花延遲，但ft缺失會導(dǎo)致PtDAL1失活，PtDAL1過表達也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型，表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復(fù)由過表達miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲，表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。技術(shù)酵母文庫多少錢
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