本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合,共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強 SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合,將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置,調(diào)控 HY5 靶基因的表達,進而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機制:CRY1 通過增強 SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進 H2A.Z 染色質(zhì)沉積,以調(diào)控 HY5 靶基因的表達和藍(lán)光條件下光形態(tài)建成。傳統(tǒng)酵母雜交技術(shù)應(yīng)用已經(jīng)30多年,技術(shù)已經(jīng)成熟穩(wěn)定。浙江歐易生物酵母文庫
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實驗、不停的花費時間驗證而頭禿了。浙江歐易生物酵母文庫酵母文庫構(gòu)建方法酵母篩庫構(gòu)建酵母文庫的意義。
酵母雙雜交文庫:為研究松樹生長時相轉(zhuǎn)變和生殖發(fā)育的奧秘,本研究收集了油松 7 個年齡段的葉片進行了轉(zhuǎn)錄組測序。加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析(WGCNA)鑒定到一個與年齡***相關(guān)的基因模塊(圖 A)。按照表達模式,可以分為 2 個子模塊:隨年齡增長而表達上升的基因子模塊、隨年齡增長而表達降低的基因子模塊(圖 B-D)。這些基因在 5-7 年營養(yǎng)生長至生殖生長過渡期發(fā)生了一個明顯的表達模式轉(zhuǎn)變,表明在生殖發(fā)育啟動階段存在一個相對劇烈的時相轉(zhuǎn)變過程。
酵母文庫實驗:本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。酵母單雜交文庫篩選選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效。
酵母單雜交篩選:(4)在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,***GL1促進HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達,并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中,***GL1過表達后,與LTR連接的螢火素酶表達上升近2倍,說明***GL1是一個轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是,文章的背景介紹內(nèi)容中,對應(yīng)用其他技術(shù)(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)對HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解,但并沒有直接評估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)(如Chip-seq、motif預(yù)測)進行了比較分析,發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對已識別因子的驗證率為30-60%,同等或優(yōu)于其他技術(shù)。文庫篩選經(jīng)驗 與上千所高校及科研院所合作 完成年均400多個物種的文庫構(gòu)建及篩選 。安徽應(yīng)用酵母文庫報價
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酵母文庫實驗由歐易生物協(xié)助完成。2021年3月,上海師范大學(xué)楊洪全教授為通訊作者,在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發(fā)表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文,報道了擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機制。上海師范大學(xué)茅志磊博士為***作者,文章中酵母文庫實驗由歐易生物協(xié)助完成。太陽光不僅為植物的光合作用提供能量來源,也是調(diào)節(jié)許多植物發(fā)育過程的關(guān)鍵環(huán)境信號。植物可以通過多種光受體監(jiān)測和響應(yīng)不同波長、方向和強度的光,其中**早發(fā)現(xiàn)的是藍(lán)光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個,其中 CRY1 主要參與調(diào)控光形態(tài)建成,CRY2 主要參與光周期開花調(diào)控。浙江歐易生物酵母文庫
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