寧波光遺傳鈣成像代理

來源: 發(fā)布時間:2025-01-02

使用MPM對神經元進行鈣成像時,通過隨機訪問掃描—即激光束在整個視場上的任意選定點上進行快速掃描—可以只掃描感興趣的神經元,這樣不僅避免掃描到任何未標記的神經纖維,還可以優(yōu)化激光束的掃描時間。隨機訪問掃描可以通過聲光偏轉器(AOD)來實現(xiàn),其原理是將具有一個射頻信號的壓電傳感器粘在合適的晶體上,所產生的聲波引起周期性的折射率光柵,激光束通過光柵時發(fā)生衍射。通過射頻電信號調控聲波的強度和頻率從而可以改變衍射光的強度和方向,這樣使用1個AOD就可以實現(xiàn)一維橫向的任意點掃描,利用1對AOD,結合其他軸向掃描技術可實現(xiàn)3D的隨機訪問掃描。但是該技術對樣本的運動很敏感,易出現(xiàn)運動偽影。目前,快速光柵掃描即在FOV中進行逐行掃描,由于利用算法可以輕松解決運動偽影而被guangfan的使用。鈣離子成像可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。寧波光遺傳鈣成像代理

寧波光遺傳鈣成像代理,鈣成像

鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細胞收縮中扮演著重要的角色,鈣離子也是神經元活動的重要“風向標”之一:當神經元膜電位發(fā)生去極化,產生的動作電位傳導到神經元軸突末梢時,細胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內流,包含神經遞質的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,下游神經元就得以接受到上游的信號。因此,鈣離子成像可以追蹤神經元動作電位,從而幫助我們了解神經元集群的活動,可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。寧波鈣成像nVoke2.0雙光子熒光顯微鏡的發(fā)展,使在實驗動物處于活動狀態(tài)下的鈣成像技術取得了飛速進展。

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研究顯示NL189BLA神經元通過投射到CEA來控制探索行為中動物的運動速度和瞬時停滯。隨著進一步的探索,該神經元群體的活性以經驗依賴性的方式增加,而NL189BLA神經元的暫時性功能喪失會導致瞬間停滯的yizhi,而且這些行為停滯與焦慮和恐懼無關。動物在這些停滯點開始和終止探索性旅程并在停滯后會改變頭部朝向和運動軌跡方向,因此在熟悉的位置進行短暫停滯可能是替代性嘗試錯誤行為的決策。這些結果揭示杏仁核作為新穎性/熟悉性檢測器以及行為效應器環(huán)路的共同作用,其具有基于探索行為期間的空間經驗來驅動或yizhi自發(fā)運動的能力,這對于動物在自然界中安全有效的探索未知環(huán)境是十分必要的。

CaMPARI,一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術,包含CaMPARI以及CaMPARI2(第二代)。其原理在于,CaMPARI蛋白在正常狀態(tài)下會發(fā)出綠色熒光,而如果對這種蛋白同時使用高濃度鈣離子與紫外光處理,它就會不可逆、長久地轉變成另一種能發(fā)出紅色熒光的構象,即實現(xiàn)將瞬間的神經元活動變成長久的紅色熒光蛋白表達。研究人員通過轉基因技術將這種新型蛋白導入到實驗動物的神經系統(tǒng)中,然后用度的紫外光照射動物的大腦,通過檢查熒光,找到發(fā)紅色熒光的神經元,這些神經元即是在紫外光照射期間活躍的神經元。由于紫外光可以對著整個大腦進行照射,所以理論上,人們可以對全腦進行檢查。傳統(tǒng)鈣成像實驗要求成像的光路極為穩(wěn)定。

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鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它們可以結合鈣離子從而顯示一個光譜響應,使研究者可以用熒光顯微鏡來觀察細胞內的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來進行鈣信號的測定和成像。并可結合電生理設備、活細胞培養(yǎng)裝置等,適用于大強度、廣范圍的鈣信號測定。共聚焦顯微系統(tǒng),共聚焦以激光為光源,且可配備氬離子光源,可以選擇可見光激發(fā)的鈣指示劑,進行層掃,相比普通熒光顯微鏡有更好的空間分辨率。并且共聚焦除了配備大視野掃描鏡更可配置共振掃描振鏡,以滿足更高速成像應用的需求。雙光子顯微系統(tǒng)使用長波長來激發(fā)熒光指示劑,具有較低的細胞毒性,也可適用于紫外激發(fā)的鈣指示劑,且可獲得和單光子共聚焦系統(tǒng)類似的空間分辨率。小結綜上可見,在研究鈣信號時,可結合樣品自身特點來選擇相應的鈣指示劑,并考慮既有的實驗設備,來確定具體的實驗方案。同時還需進一步摸索實驗數(shù)據的校正、控制等多種影響因素,可獲得可靠的圖像及熒光定量數(shù)據。鈣是模型動物神經細胞內重要的第二信使,參與細胞多種功能的調節(jié),可以產生多種細胞內信號。上海inscopix鈣成像動物行為學

近年來出現(xiàn)了通過植入性的顯微鏡或透鏡進行活動動物鈣成像的技術。寧波光遺傳鈣成像代理

細胞內鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當神經細胞興奮時,會產生一個電沖動,在此時,細胞外的鈣離子回流入該細胞內,促使這個細胞分泌神經遞質,神經遞質與相鄰的下一級神經細胞膜上的蛋白分子相結合,促使這個一級神經細胞產生新的電沖動。以此類推,神經信號便一級一級地傳遞下去,從而構成復雜的信號體系,形成了學習、記憶等大腦的高級功能。在哺乳動物神經系統(tǒng)中,鈣離子同樣扮演著重要的信號分子的角色。寧波光遺傳鈣成像代理