培養(yǎng)基配置原則:營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適,培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時微生物才能生長良好,營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質(zhì)、無機鹽、重金屬離子等不但不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養(yǎng)基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則大量增加。再如,在發(fā)酵生產(chǎn)過程中,可以通過控制培養(yǎng)基中有效氮(或碳)源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與的合成協(xié)調(diào)。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器報價
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器報價對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。
培養(yǎng)基制備方法與注意事項:1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,好好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,Z后必須加以補足。液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應詞,是微生物或動植物細胞的液狀培養(yǎng)基。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水攪拌均勻。如準備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因為銅或鐵容器可能會導致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標,影響實驗結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應和沉淀的藥物應單獨溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性。青海自動培養(yǎng)基制備器
有時需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當提高滅菌溫度。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器報價
培養(yǎng)基的性能測試:外觀控制:制備好的培養(yǎng)基應有相應的顏色,一般的培養(yǎng)基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化,是否蒸發(fā)/脫水。污染控制:從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進行污染測試(空白試驗),確定無微生物生長方可使用。同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,很終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器報價
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