馬尾藻是我國南海常見的大型經(jīng)濟褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產(chǎn)物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對制備的褐藻多糖及寡糖進行純化、結(jié)構(gòu)分析和活性評價。研究結(jié)果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應(yīng)面優(yōu)化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質(zhì)量分數(shù)3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達到81.93%,多糖保留率92.17%;優(yōu)化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時,脫色率達到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對初步純化后的多糖進一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產(chǎn)褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發(fā)酵制備粗酶液,發(fā)酵液酶活為15.20U/ml。褐藻寡糖噴后6小時內(nèi)遇雨補噴，本品不要與堿性農(nóng)藥等物質(zhì)混用。福建褐藻寡糖凝膠婦
對初步純化的褐藻膠裂解酶進行了酶學(xué)性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4～40℃、pH6～8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對該酶有促進作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時,還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強,在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強的保濕效果,36h時褐藻寡糖的保濕率達到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對白色念珠菌具有抑菌效果,對另3種細菌無抑制。 安徽褐藻寡糖如何食用褐藻寡糖是褐藻膠的降解產(chǎn)物，是一種無支鏈陰離子寡糖，由β-D-甘露糖醛酸和古羅糖醛酸構(gòu)成。
從植物生長與抵抗逆境的特性出發(fā)，利用外源性寡糖對其進行作用，通過檢測植物生長指標和抗逆指標變化，來研究寡糖在植物促生長與誘導(dǎo)抗逆過程中的作用機制。一方面對褐藻寡糖在植物促生長與抗逆領(lǐng)域的作用機理進行表征，另一方面，也希望能夠通過此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻。選擇三種來源（褐藻膠、果膠、殼聚糖）的不同分子量大小的九種寡糖片段進行研究。利用植物的促生長和抗逆指標進行篩選，獲得了一種既具有明顯的促生長作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，為褐藻寡糖HZ3，經(jīng)過質(zhì)譜分析，其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細胞為材料，建立起寡糖促生長的綜合性的驗證方法。對植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米，利用寡糖浸種，分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化，結(jié)合種子與植株的生長指標，探討寡糖的促生長作用機理。
為了研究褐藻寡糖與細胞的結(jié)合機制與作用規(guī)律，利用激光共聚焦技術(shù)對標記的寡糖與煙c細胞進行結(jié)合，觀察其動態(tài)結(jié)合過程，研究發(fā)現(xiàn)，褐藻寡糖能夠與植物的細胞壁進行結(jié)合，又可以穿過細胞壁進入細胞內(nèi)部與細胞膜進行結(jié)合。通過將蛋白酶以及蛋白變性劑SDS對膜蛋白進行處理后研究發(fā)現(xiàn)能夠?qū)烟堑慕Y(jié)合產(chǎn)生影響。表明褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過封閉細胞膜上的鈣離子通道，對其進行阻斷后結(jié)合寡糖，研究發(fā)現(xiàn)，褐藻寡糖與細胞膜的結(jié)合與鈣離子通道無關(guān)。 褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信號分子，能夠參與植物的生長調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)抗病的過程。
褐藻寡糖對CAT活性的影響植物遭受低溫傷害時,過氧化氫酶系統(tǒng)首先受到破壞損傷,造成體內(nèi)過氧化氫去除鏈條斷裂、積累增加,由于過氧化氫積累可以嚴重損害植物細胞膜和其它代謝酶類,因此CAT活力能夠反映植物去除過氧化氫能力強弱和植物遭受損程度大小。圖6為煙C葉片CAT活力變化。由圖可知,水處理組在低溫脅迫后,短時間內(nèi)CAT活力迅速下降,隨著時間延長,植物體內(nèi)抗逆反應(yīng)啟動,會增加CAT生成以去除積累的過氧化氫,因此CAT含量又緩慢升高。噴施寡糖后進行低溫脅迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO組中煙CCAT活力變化規(guī)律相似:短時間內(nèi)均能夠誘導(dǎo)煙CCAT活力迅速升高,12h達到高峰,且峰值都高于空白對照,隨著時間延長,CAT活力又緩慢下降,以0.20%褐藻寡糖的誘導(dǎo)效果好;0.10%褐藻寡糖處理組在6～24h之內(nèi)CAT含量與對照相比變化較小,但48h煙C葉片CAT活力迅速下降,說明CAT受到破壞而活力降低。高濃度1.00%褐藻寡糖組經(jīng)過相同時間低溫脅迫,其CAT活力均低于水處理組,說明1.00%褐藻寡糖對煙C產(chǎn)生了毒副作用,加劇了煙C葉片損傷。幼苗葉中葉綠素含童增高葉片凈光合速率、胞間濃度、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率增加。內(nèi)蒙古褐藻寡糖凝膠
褐藻寡糖作為一種信號分子，還參與調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育能調(diào)控生物合成過程從而保護果實品質(zhì)提高果實的產(chǎn)量。福建褐藻寡糖凝膠婦
褐藻寡糖在植物生長中的使用，可以增強植物對外界環(huán)境的適應(yīng)能力，對提高作物產(chǎn)量及品質(zhì)也具有非常重要的意義，同時褐藻寡糖本身在環(huán)境中自然降解，無殘留無污染，可以減少化肥和農(nóng)藥的使用，提高了環(huán)保效益。由于褐藻寡糖是由褐藻膠降解得到的小分子量片段，不同的降解方法或不同的降解酶會導(dǎo)致褐藻寡糖的分子量大小不同，分子量大小的不同可能會在促進植物生長方面有不同的效果。而目前有關(guān)于褐藻寡糖促進植物生長的研究比較少，且目前未有關(guān)于不同分子量褐藻寡糖促進植物生長的報道。黃瓜是我國重要的蔬菜作物，促進生長的環(huán)保肥料的研發(fā)和應(yīng)用對黃瓜的生產(chǎn)實踐具有重要的意義。本研究通過探究不同分子量的褐藻寡糖在促進黃瓜幼苗的生長方面的作用，旨在發(fā)掘褐藻寡糖更多的生物功能。 福建褐藻寡糖凝膠婦
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