從植物生長與抵抗逆境的特性出發(fā),利用外源性寡糖對其進行作用,通過檢測植物生長指標(biāo)和抗逆指標(biāo)變化,來研究寡糖在植物促生長與誘導(dǎo)抗逆過程中的作用機制。一方面對褐藻寡糖在植物促生長與抗逆領(lǐng)域的作用機理進行表征,另一方面,也希望能夠通過此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻。選擇三種來源(褐藻膠、果膠、殼聚糖)的不同分子量大小的九種寡糖片段進行研究。利用植物的促生長和抗逆指標(biāo)進行篩選,獲得了一種既具有明顯的促生長作用,又具有抗逆作用的寡糖片段,為褐藻寡糖HZ3,經(jīng)過質(zhì)譜分析,其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料,建立起寡糖促生長的綜合性的驗證方法。對植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米,利用寡糖浸種,分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化,結(jié)合種子與植株的生長指標(biāo),探討寡糖的促生長作用機理。褐藻寡糖能夠作為信號調(diào)節(jié)分子作用于植物,促進植物的生長,此研究為海洋活性寡糖的開發(fā)開辟了新的途徑。陜西褐藻寡糖廠
AOS增強植株對致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分別噴施擬南芥和本氏煙,24h后,接種致病疫霉。結(jié)果顯示與噴施ddH2O的植株相比,AOS處理的葉片接種部位的水漬及葉片的黃化程度明顯降低,檢測致病疫霉菌絲的生長量也明顯低于對照,表明AOS也可以增強植株對致病疫霉的抗性。AOS誘導(dǎo)植物早期免疫應(yīng)答反應(yīng)對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行相關(guān)免疫反應(yīng)的檢測。結(jié)果顯示,在氣孔開度方面,與ddH2O處理的對照組相比,AOS處理的本氏煙葉片的氣孔開度明顯較低,表明AOS通過調(diào)節(jié)葉片表面氣孔的開合抑制病原菌的入侵。分別于2h、4h、8h、24h和48h時,對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行DAB和NBT組織化學(xué)染色,發(fā)現(xiàn)噴施ddH2O的葉片染色程度較淺,而噴施AOS的葉片染色程度較深,且在24h時染色深。qRT-PCR檢測ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表達(dá)水平,顯示RbohB基因表達(dá)量明顯上調(diào),CAT基因表達(dá)量明顯下降,說明AOS可以通過抑制CAT基因和促進RbohB基因的表達(dá),提高過氧化氫的積累。天津褐藻寡糖提高玉米褐藻寡糖對植物的抗逆機制是通過誘導(dǎo)作用實現(xiàn)的。
褐藻膠寡糖能夠促使大麥克服休眠、激發(fā)大麥發(fā)芽、加速大麥發(fā)芽速率和提高發(fā)芽能力,這說明褐藻膠寡糖能夠促進谷物種子萌發(fā)的激發(fā)子。本研究結(jié)果表明,在大麥發(fā)芽過程中,通過在浸麥過程中添加褐藻膠寡糖能促進水解酶活力的提高,進而使麥芽的溶解性能顯著提高,縮短了制麥周期,同時顯著提高了麥芽質(zhì)量和麥汁得率。生物活性寡糖作為外源激發(fā)子對種子萌發(fā)、植物生長及防御反應(yīng)具有一定的調(diào)節(jié)功能。這一結(jié)果可能是由于褐藻膠寡糖作為帶負(fù)電的生物活性寡糖,被植物吸收后,在質(zhì)外體空間與Ca2+結(jié)合,形成糖-鈣復(fù)合物,打破植物體內(nèi)的鈣穩(wěn)定平衡,使胞質(zhì)Ca2+濃度增加,從而激發(fā)種子萌發(fā)相關(guān)酶類。此外,還可能通過調(diào)控內(nèi)源激S水平及其平衡來激發(fā)種子細(xì)胞水解酶活性,終表現(xiàn)為大麥發(fā)芽速率的增加和麥芽品質(zhì)的改善。褐藻膠寡糖具有獨特的化學(xué)結(jié)構(gòu),其在細(xì)胞表面的接受蛋白、信號傳導(dǎo)途徑及下游相關(guān)基因表達(dá)的分子機制還不清楚,有待進一步深入研究。
褐藻寡糖對煙C葉片葉綠素含量的影響葉綠素是高等植物進行光合作用的主要成分,葉綠素?fù)p失或者破壞會嚴(yán)重影響植物生長發(fā)育進程,在某種程度上葉綠素含量多少表征著植物健康程度。圖3和圖4是煙C葉片中葉綠素a和葉綠素b在噴施褐藻寡糖后的變化結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn):經(jīng)過6h低溫脅迫,水處理組葉綠素a和b含量分別下降了23.9%和6.0%,隨著時間延長,2種葉綠素含量繼續(xù)減少,48h后分別只有對照的51.2%和78.3%,說明在低溫脅迫下,水處理組葉綠素受到低溫?fù)p傷破壞,且隨著時間延長,破壞不斷加劇。在2種葉綠素中,葉綠素a比葉綠素b更容易受到低溫破壞。噴施了0.05%~0.30%褐藻寡糖后進行低溫脅迫,煙C葉片葉綠素a和b含量比水處理組有不同程度升高,表明此濃度范圍內(nèi)寡糖能夠減輕低溫對葉綠素的損傷,其中以0.20%寡糖溶液效果明顯,但0.10%褐藻寡糖處理組在48h時葉綠素a和b的含量都有較大幅度下降,表明葉綠素受到破壞損傷;高濃度1.00%褐藻寡糖對煙C起破壞作用,與對照組相比,葉綠素a和b含量都有較大幅度減少,隨時間延長,二者含量繼續(xù)降低,表明煙C葉綠素?fù)p傷加劇。褐藻膠寡糖在調(diào)控植物生理活動中有重要作用,如參與根的生長、非生物脅迫(干旱和鹽堿)以及植物的免疫等。
對初步純化的褐藻膠裂解酶進行了酶學(xué)性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4~40℃、pH6~8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對該酶有促進作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時,還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強,在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強的保濕效果,36h時褐藻寡糖的保濕率達(dá)到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對白色念珠菌具有抑菌效果,對另3種細(xì)菌無抑制。 寡糖作為信號分子與作物細(xì)胞結(jié)合并相互作用,引起作物的相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。新疆褐藻寡糖沖洗
褐藻寡糖與作物細(xì)胞作用后還可以在細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,對細(xì)胞的生物活性進行調(diào)節(jié),增強植物抗病能力。陜西褐藻寡糖廠
馬尾藻是我國南海常見的大型經(jīng)濟褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產(chǎn)物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對制備的褐藻多糖及寡糖進行純化、結(jié)構(gòu)分析和活性評價。研究結(jié)果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應(yīng)面優(yōu)化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質(zhì)量分?jǐn)?shù)3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達(dá)到81.93%,多糖保留率92.17%;優(yōu)化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時,脫色率達(dá)到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對初步純化后的多糖進一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產(chǎn)褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發(fā)酵制備粗酶液,發(fā)酵液酶活為15.20U/ml。陜西褐藻寡糖廠
青島頌田生物技術(shù)有限公司是以殼寡糖,海藻精,魚蛋白,褐藻寡糖研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的目前產(chǎn)品服務(wù)分為四大類,上百種種產(chǎn)品及技術(shù)服務(wù): ①以海洋生物酶解技術(shù)輸出和特種肥料產(chǎn)品開發(fā)為重點的技術(shù)服務(wù)項目; ②以殼寡糖、海藻提取物和魚蛋白等海洋原料為重點的原材料供應(yīng); ③以海洋生物肥料、生物制劑產(chǎn)品為重點的作物營養(yǎng)綜合解決方案; ④以動物保健添加劑、食品保健添加劑為重點的酶解提取物。企業(yè),公司成立于2007-11-19,地址在即墨市通濟街道辦事處夏堤河村。至創(chuàng)始至今,公司已經(jīng)頗有規(guī)模。公司具有殼寡糖,海藻精,魚蛋白,褐藻寡糖等多種產(chǎn)品,根據(jù)客戶不同的需求,提供不同類型的產(chǎn)品。公司擁有一批熱情敬業(yè)、經(jīng)驗豐富的服務(wù)團隊,為客戶提供服務(wù)。5%深海多糖素,碧肽,SONTI魚蛋白,蘇魯特,頌田魚蛋白粉,植海植素,碧施地,澳洛菲-高鉀型,澳洛菲-平衡型集中了一批經(jīng)驗豐富的技術(shù)及管理專業(yè)人才,能為客戶提供良好的售前、售中及售后服務(wù),并能根據(jù)用戶需求,定制產(chǎn)品和配套整體解決方案。青島頌田生物技術(shù)有限公司本著先做人,后做事,誠信為本的態(tài)度,立志于為客戶提供殼寡糖,海藻精,魚蛋白,褐藻寡糖行業(yè)解決方案,節(jié)省客戶成本。歡迎新老客戶來電咨詢。