對于兩個遠(yuǎn)距離(相距1-2mm以上)的成像部位,通常采用兩個**的路徑進(jìn)行成像;對于相鄰區(qū)域,通常使用單個物鏡的多個光束進(jìn)行成像。多光束掃描技術(shù)必須特別注意激發(fā)光束之間的串?dāng)_,這可以通過事后光源分離或時空復(fù)用來解決。事后光源分離法是指分離光束以消除串?dāng)_的算法;...
國內(nèi)顯微鏡制造市場目前斷層嚴(yán)重。目前我國顯微鏡行業(yè)發(fā)展缺乏技術(shù)沉淀,20年以上經(jīng)營積累的企業(yè)十分稀缺,深度精密制造、光學(xué)主要部件設(shè)計及工藝嚴(yán)重制約產(chǎn)業(yè)升級。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統(tǒng)、蔡司、尼康、奧林巴斯等國...
傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行活動動物成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信...
包含鈣離子指示劑的細(xì)胞可以通過熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)觀測,然后通過CCD攝像機(jī)捕捉、記錄圖像。現(xiàn)在鈣成像技術(shù)主要在以下幾類神經(jīng)科學(xué)研究方面有廣泛應(yīng)用:1.記錄培養(yǎng)的神經(jīng)元的活動。2.記錄腦片上神經(jīng)元的活動。3.huoti記錄...
對于雙光子(2P)成像,散焦和近表面熒光激發(fā)是兩個相對較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像,這兩個問題**減少。然而,由于熒光團(tuán)的吸收截面遠(yuǎn)小于2P,三光子成像需要更高的脈沖能量才能獲得與2P相同激發(fā)強(qiáng)度的熒光信號。功能性3P顯微鏡比結(jié)構(gòu)性3P顯微鏡要...
細(xì)胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當(dāng)個細(xì)胞興奮時,產(chǎn)生了一個電沖動,此時,細(xì)胞外的鈣離子流入該細(xì)胞內(nèi),促使該細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細(xì)胞膜上的蛋白分子結(jié)合,促使這一級神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生新的電沖動。以此類推,神經(jīng)信號便一級一級...
從雙光子到三光子:科學(xué)家正在從雙光子轉(zhuǎn)向三光子顯微鏡。1996年,ChrisXu在康奈爾大學(xué)(Denk同導(dǎo)師實驗室)讀博期間發(fā)明了三光子顯微鏡,如果雙光子吸收可行,那么三光子看起來也是自然的發(fā)展方向。三光子成像使用更長的波長,大約在1.3和1.7微米,其成像深...
鈣成像具有以下幾個優(yōu)勢:1.非侵入性:鈣成像技術(shù)可以在活物細(xì)胞或組織中進(jìn)行觀察,無需破壞細(xì)胞或組織的完整性,因此是一種非侵入性的技術(shù)。2.高時空分辨率:鈣成像技術(shù)可以實時觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子的動態(tài)變化,具有較高的時空分辨率??梢圆蹲降解}離子濃度的瞬時變化,揭示細(xì)胞...
轉(zhuǎn)基因Ca2+指示劑:轉(zhuǎn)基因技術(shù)和光遺傳技術(shù)的飛速發(fā)展,催生了基因編碼的Ca2+指示劑(GECIs)。它們不依賴于熒光染料,可以靶向特定的組織,如神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、T細(xì)胞等,并且可以避免熒光指示劑帶來的的許多問題,是監(jiān)測轉(zhuǎn)基因動物體內(nèi)鈣離子的一個極好的工具。...
現(xiàn)在有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,且都可以用于體內(nèi)和體外研究。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個神經(jīng)元中。此方法方便實驗者控制單個神經(jīng)元內(nèi)的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負(fù)...
光學(xué)顯微鏡從1590年發(fā)明以來,不斷發(fā)展,促進(jìn)生命科學(xué)日新月異的發(fā)現(xiàn),幫助人類逐層打開生命本質(zhì)的大門。同時,生命科學(xué)的發(fā)展不斷給光學(xué)顯微鏡提出新的要求,促使成像理論和技術(shù)持續(xù)更新迭代??茖W(xué)進(jìn)入21世紀(jì),人們已經(jīng)不滿足于在體外研究細(xì)胞和組織,需要能夠更真實地探索...
鈣成像具有以下幾個優(yōu)勢:1.非侵入性:鈣成像技術(shù)可以在活物細(xì)胞或組織中進(jìn)行觀察,無需破壞細(xì)胞或組織的完整性,因此是一種非侵入性的技術(shù)。2.高時空分辨率:鈣成像技術(shù)可以實時觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子的動態(tài)變化,具有較高的時空分辨率??梢圆蹲降解}離子濃度的瞬時變化,揭示細(xì)胞...
科學(xué)家利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動。隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此daibiao細(xì)胞...
鈣成像技術(shù)通常使用熒光染料或報告基因來標(biāo)記細(xì)胞中的鈣離子。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時,鈣離子會進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),導(dǎo)致熒光染料或報告基因發(fā)出光信號。通過觀察光信號的強(qiáng)度和分布,可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn):高靈敏度:可以檢測到細(xì)胞內(nèi)微小的鈣離子濃...
目前可用的指示劑較多,根據(jù)熒光光譜、與鈣離子親和力及其化學(xué)特性的不同大致分為化學(xué)性鈣離子指示劑和基因編碼鈣離子指示劑。前者指可特異性與鈣離子結(jié)合的小分子,常用的有fura-2、indo-1等;而后者主要指來源于綠色熒光蛋白GFP及其變異體的蛋白質(zhì),可與鈣調(diào)蛋白...
哺乳動物進(jìn)入睡眠后神經(jīng)元活動發(fā)生了戲劇性的變化,覺醒的神經(jīng)元活動被認(rèn)為會增加睡眠需求。其他腦細(xì)胞(膠質(zhì)細(xì)胞)在自然睡眠-覺醒周期中的變化以及它們在睡眠調(diào)節(jié)中的作用相對來說還沒有被研究過。華盛頓州立大學(xué)ElsonS.Floyd醫(yī)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)系的MarcosG.F...
雙光子顯微鏡在各領(lǐng)域研究中已有許多成功實例;生物領(lǐng)域:貝爾實驗室的Svoboda等人研究了大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子動力學(xué)情形。利用雙光子顯微鏡觀察到的現(xiàn)象證明了鈣離子的增加依賴于肌體觸發(fā)的鈉離子作用電勢。信息領(lǐng)域:美國科學(xué)家Rentzepis提出了一種在現(xiàn)有...
雙光子熒光顯微鏡(Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy)。雙光子顯微成像技術(shù)是近些年發(fā)展起來的結(jié)合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新型非線性光學(xué)成像方法,采用長波激發(fā),能對組織進(jìn)行深層次成像。常用的比較好激發(fā)波長大多...
雙光子顯微鏡是結(jié)合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新技術(shù)。雙光子激發(fā)的基本原理是:在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子,在經(jīng)過一個很短的所謂激發(fā)態(tài)壽命的時間后,發(fā)射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去...
一項由葡萄牙尚帕莫未知中心,牛津大學(xué),哥倫比亞大學(xué),荷蘭鹿特丹伊拉斯謨大學(xué),麻省理工學(xué)院,倫敦大學(xué),德國MaxPlanck生物控制論研究所,德國圖歐賓根大學(xué)多方合作的研究于2020年11月4日在Neuron上發(fā)表了題為TheAnteriorCingulateC...
傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行活動動物成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信...
鈣成像是一種用于觀察和研究細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化的技術(shù)。鈣離子在細(xì)胞內(nèi)起著重要的調(diào)節(jié)作用,參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化等生物過程。鈣成像技術(shù)通過使用熒光探針或基因工程技術(shù)將熒光蛋白與鈣離子結(jié)合,使其能夠發(fā)出熒光信號。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度發(fā)生變化時,熒光信號...
現(xiàn)在有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,且都可以用于體內(nèi)和體外研究。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個神經(jīng)元中。此方法方便實驗者控制單個神經(jīng)元內(nèi)的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負(fù)...
眾所周知,只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,同時也受鈣結(jié)合蛋白的影響。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時受體電位C型通道(TRPC)等。...
細(xì)胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞興奮時,會產(chǎn)生一個電沖動,在此時,細(xì)胞外的鈣離子回流入該細(xì)胞內(nèi),促使這個細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細(xì)胞膜上的蛋白分子相結(jié)合,促使這個一級神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生新的電沖動。以此類推,神經(jīng)信...
無創(chuàng)睡眠監(jiān)視系統(tǒng)是如何工作的呢?首先,實驗動物被放置在一個特制的實驗籠內(nèi),這個籠子配備了高精度的傳感器,能夠精確地監(jiān)測實驗動物的各種生理指標(biāo),包括心率、呼吸率、體溫等。這些傳感器將收集的數(shù)據(jù)傳輸?shù)竭B接的電腦上,通過特定的軟件進(jìn)行分析和處理。這個系統(tǒng)可以實時顯示...
細(xì)胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當(dāng)di1個細(xì)胞興奮時,產(chǎn)生了一個電沖動,此時,細(xì)胞外的鈣離子流入該細(xì)胞內(nèi),促使該細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細(xì)胞膜上的蛋白分子結(jié)合,促使這一級神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生新的電沖動。以此類推,神經(jīng)信號便一...
哺乳動物進(jìn)入睡眠后神經(jīng)元活動發(fā)生了戲劇性的變化,覺醒的神經(jīng)元活動被認(rèn)為會增加睡眠需求。其他腦細(xì)胞(膠質(zhì)細(xì)胞)在自然睡眠-覺醒周期中的變化以及它們在睡眠調(diào)節(jié)中的作用相對來說還沒有被研究過。華盛頓州立大學(xué)ElsonS.Floyd醫(yī)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)系的MarcosG.F...
PiezoSleep無創(chuàng)睡眠監(jiān)測系統(tǒng)只需要將實驗動物直接放在實驗籠內(nèi),儀器自動監(jiān)測,無任何手術(shù)操作。PiezoSleep無創(chuàng)睡眠監(jiān)測系統(tǒng)無創(chuàng)睡眠監(jiān)測系統(tǒng)、在自由行為動物上進(jìn)行睡眠/覺醒的追蹤監(jiān)測,建立一個無創(chuàng)睡眠的實驗環(huán)境在不對動物進(jìn)行任何的手術(shù),不對動物造成...
對新環(huán)境的探索確保了生存和進(jìn)化的適應(yīng)性,這是通過根據(jù)經(jīng)驗動態(tài)變化的探索性回合和逮捕來表達(dá)的。因此,調(diào)節(jié)探索性行為的神經(jīng)環(huán)路應(yīng)該參與經(jīng)驗的整合,并利用它來選擇適當(dāng)?shù)男袨檩敵?。通過空間探索分析,研究人員發(fā)現(xiàn)在之前動物被逮捕的地點(diǎn),瞬間逮捕數(shù)隨著經(jīng)驗的增加而增加。在...