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Tris衍生緩沖液除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或WesternBlotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA的堿基有保護性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時間電泳時***使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。試劑級TRIS-HCl中美雙報注意事項?山西采購TRIS需求
Tris-HCl緩沖液的緩沖原理為:Tris中的-NH2與HCl結合生成Tris·HCl鹽。季銨基團Tris·H+與Tris形成緩沖對,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡關系,憑借該平衡移動來發(fā)揮緩沖作用。其緩沖范圍一般為7.0~9.0。由于Tris對生化過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,所以在DNA、蛋白質(zhì)等生物大分子實驗中經(jīng)常應用,Tris-HCl緩沖溶液可以做DNA、蛋白質(zhì)的溶解液或提取液,也是DNA相關研究實驗中的重要緩沖液,如DNA的捕獲與釋放、染色體的特異性標記等方面。具體應用方面,目前已上市的**mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)選用Tris作為緩沖體系。已上市抗體藥物中也有Tris的應用,如全球較早全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑注射用依那西普(Enbrel,恩利)。吉林輔料TRIS醫(yī)院采購AVT多級別TRIS-HCl現(xiàn)貨直銷!
相比之下,二者***中糖類保護劑的不同就變得非常突出。17年的Shingrix***中使用蔗糖作為保護劑,23年獲批的Arexvy則已經(jīng)將蔗糖替換為了海藻糖。這又是為什么呢? 1. 糖類作為保護劑廣泛應用于蛋白類制劑中 幾乎所有蛋白類制劑(單抗、多抗、ADC、重組蛋白疫苗等)***中都會添加糖類作為保護劑。這是因為糖類可以通過不同作用機制,在液體、凍干粉等不同劑型中,為蛋白質(zhì)提供保護作用,從而提升制劑長期穩(wěn)定性。 糖類保護劑中,應用**多的種類是蔗糖和海藻糖。據(jù)統(tǒng)計,在所有FDA批準上市的抗體藥物中,超過50%添加蔗糖作為保護劑,超過25%的品種則選擇海藻糖作為保護劑。
Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應用。應用于體內(nèi)時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強。①Moderna**核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)將SM-102、DSPC、膽固醇以及PEG脂質(zhì)與溶于pH5.0乙酸鹽緩沖液中的mRNA以2.5:1(脂質(zhì):mRNA)的比例混合,再將混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作為冷凍保護劑,***將制備得到的溶液進行無菌過濾,-70℃下冷凍保存準備進一步使用。AVT多級別TRIS-HCl工廠直銷!
由于可電離脂質(zhì)在LNP結構及功能上的重要性,短時間內(nèi)很難將其替換。因此,為提高mRNA分子的穩(wěn)定性,降低mRNA-LNP疫苗儲存要求,延長其有效期,選擇TRIS緩沖液同時發(fā)揮pH調(diào)節(jié)劑與醛基清除劑的作用是一個值得嘗試的方向。此外,參考已上市脂質(zhì)體藥物制劑***,通過添加抗氧化劑減少LNP制劑中可電離脂質(zhì)的氧化,從而減少醛基的產(chǎn)生,或許也是一個值得借鑒的選項,如兩性霉素B脂質(zhì)體Ambisome®***中的α-生育酚等。艾偉拓氨丁三醇現(xiàn)貨在售多級別TRIS-HCl現(xiàn)貨直銷!河南高純TRIS
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實際應用中各緩沖對組成的緩沖溶液都有比較好的緩沖范圍。在實際生產(chǎn)過程中,如果選擇的緩沖溶液緩沖范圍與預期偏差較大,使用大量強酸/強堿或許可以強行將溶液pH調(diào)至預期值,但此時溶液體系的緩沖容量已消耗殆盡,無法起到應有的緩沖保護效果,對制劑產(chǎn)品后續(xù)的加工及長期儲存穩(wěn)定性造成影響。因此,要用好緩沖溶液,需對不同的緩沖溶液有具體的了解。以下介紹幾種常見的緩沖溶液及用途,為大家深入理解緩沖溶液提供參考。艾偉拓氨丁三醇山西采購TRIS需求