備案登記號(hào)HEPES如何購買

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-01

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常少不了HEPES緩沖液。那么,HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢,在開放式的培養(yǎng)條件中,若加入HEPES,可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高,從而將PH維持在7.0左右。HEPES分子量為238.31,化學(xué)名:4-羥乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物緩沖劑,pH值緩沖范圍:6.8-8.2,用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對(duì)細(xì)胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑,能較長時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽。備案登記號(hào)HEPES如何購買

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使用注射級(jí)氨丁三醇緩沖劑的注意事項(xiàng):1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃時(shí)緩沖液的pH=8.4,則37℃時(shí)的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會(huì)起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴(yán)密封;5.Tris緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與注射級(jí)氨丁三醇溶液具有兼容性的電極;6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;7.吸入,攝入,皮膚吸收注射級(jí)氨丁三醇可造成傷害,操作時(shí)需戴好手套和護(hù)目鏡;8.作為蛋白緩沖液時(shí),若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用注射級(jí)氨丁三醇,比較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。供注射用HEPES藥用采購注射級(jí),低內(nèi)***、國產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價(jià)比注射級(jí)HEPES找AVT!

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HEPES使用方法有兩種:(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。需要注意的是,HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L,對(duì)細(xì)胞無毒性作用。一般情況下,濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力?,F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶,大家根據(jù)實(shí)際情況正確靈活配制就OK了

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(5)緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊:①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,一般現(xiàn)用現(xiàn)配。同時(shí)需要注意Tris是一級(jí)脂肪胺,分子結(jié)構(gòu)中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應(yīng),是一些生化實(shí)驗(yàn)的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好,但磷酸根具有一定的絡(luò)合能力會(huì)抑制一些與金屬離子有關(guān)的生化反應(yīng)。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑,但其有多種生物學(xué)效應(yīng),如:縮短血液凝固時(shí)間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細(xì)胞膜上的陰離子通道等,在一定程度上會(huì)影響患者身體狀態(tài),使用時(shí)應(yīng)需注意。國內(nèi)AVT穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES!重慶備案登記號(hào)HEPES價(jià)格

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HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4攝氏度保存。備案登記號(hào)HEPES如何購買

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