外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染,其主要成分為HEPES,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,能有效控制pH在范圍,尤其在pH具有較好的緩沖能力,終濃度一般為mmol/L,培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達(dá)到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其**適pH值為,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜,Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過(guò)甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。AVT穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽。云南現(xiàn)貨HEPES需求
羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(HEPES)4-羥乙基哌嗪乙磺酸(簡(jiǎn)稱HEPES),分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),又含有兩個(gè)堿性叔胺氮,所以呈現(xiàn)兩性,可用來(lái)配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中,再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對(duì)其pH值影響不大,因此能夠較長(zhǎng)時(shí)間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性,易給出H+;兩個(gè)叔胺氮各含有一個(gè)孤對(duì)電子,呈現(xiàn)堿性,可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對(duì)。而且,單個(gè)HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽,即兩性離子。在水溶液中,HEPES分子、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系,憑借該平衡關(guān)系的移動(dòng)來(lái)抵御外來(lái)酸堿的影響來(lái)調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定,所以具有緩沖作用,其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見(jiàn)下圖。黑龍江輔料HEPES藥用采購(gòu)注射級(jí),低內(nèi)***、國(guó)產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價(jià)比注射級(jí)HEPES找AVT!
緩沖溶液的作用原理是通過(guò)互為酸堿緩沖對(duì)之間的酸堿平衡移動(dòng)來(lái)抵御外加少量酸、堿以及稀釋作用的。緩沖溶液自身pH值可根據(jù)公式進(jìn)行計(jì)算,緩沖溶液的緩沖能力可以用緩沖容量進(jìn)行標(biāo)度。但是,任何緩沖溶液的緩沖能力都是有限的,因?yàn)楫?dāng)大量的H+或OH-進(jìn)入溶液時(shí),緩沖溶液中的緩沖對(duì)將被大量消耗,抗堿、抗酸的作用也隨之減弱直到消失。實(shí)際應(yīng)用中各緩沖對(duì)組成的緩沖溶液都有比較好的緩沖范圍。在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中,如果選擇的緩沖溶液緩沖范圍與預(yù)期偏差較大,使用大量強(qiáng)酸/強(qiáng)堿或許可以強(qiáng)行將溶液pH調(diào)至預(yù)期值,但此時(shí)溶液體系的緩沖容量已消耗殆盡,無(wú)法起到應(yīng)有的緩沖保護(hù)效果,對(duì)制劑產(chǎn)品后續(xù)的加工及長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性造成影響。
HEPES(4-2-羥乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量為238.31,化學(xué)名:4-羥乙基哌口秦乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。HEPES是制備緩沖液的有機(jī)物質(zhì),為非離子兩性緩沖液,在pH 7.2 - 7.4范圍內(nèi)具有很好的緩沖能力。 ***用于細(xì)胞培養(yǎng),為了維持穩(wěn)定的生理pH值,20下的pKa為7.55。 HEPES用于保護(hù)冷凍酶溶液免受冷凍誘導(dǎo)的pH變化的影響。 考慮到HEPES的光毒性(暴露于環(huán)境光會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化氫),該緩沖劑配置溶液后,保存在黑暗的環(huán)境中,以便在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中正常工作。GMP條件下生產(chǎn)注射級(jí)HEPES。
HEPES緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn),所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有***的應(yīng)用,如可用于開(kāi)放式細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞的長(zhǎng)期觀察、RNA或DNA提取試劑盒中。其次,相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)。另外,HEPES緩沖溶液對(duì)鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明,HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。具體應(yīng)用方面,如鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液(Onivyde)。艾偉拓國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES!四川備案登記號(hào)HEPES批量
注射級(jí),低內(nèi)***、國(guó)產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價(jià)比注射級(jí)HEPES找艾偉拓!云南現(xiàn)貨HEPES需求
儲(chǔ)存方法:HEPES緩沖液在2-8℃下可保存1年。注意事項(xiàng):HEPES緩沖液運(yùn)輸時(shí)需要加冰袋。但儲(chǔ)存時(shí)避免冷凍,否則會(huì)有鹽類(lèi)物質(zhì)析出。N-三(羥甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一種兩性離子緩沖液,名字由Tris和glycine衍生而來(lái),結(jié)構(gòu)類(lèi)似于Tris,但是高濃度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”緩沖液之一,**初開(kāi)發(fā)用于提供葉綠體反應(yīng)的緩沖體系。Tricine的有效pH緩沖范圍為7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做電泳緩沖液,以及用來(lái)重懸細(xì)胞沉淀。Tricine具有低負(fù)電荷和高離子強(qiáng)度的特性,非常適用于電泳分離1~100kDa的低分子量蛋白?;谖灮鹣x(chóng)熒光素酶的ATP分析實(shí)驗(yàn)中,比較10種常見(jiàn)的緩沖液,Tricine(25mM)表現(xiàn)出比較好的檢測(cè)效果。另外,在自由基誘導(dǎo)的膜損傷實(shí)驗(yàn)中,Tricine還是一種有效的羥自由基清除劑。作者:泰安格林化工鏈接:云南現(xiàn)貨HEPES需求
【關(guān)于我們】艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司AVT.是國(guó)內(nèi)一家專營(yíng)磷脂類(lèi)藥用輔料的科技公司,旗下產(chǎn)品覆蓋天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等細(xì)分領(lǐng)域,并提供諸如油酸、油酸鈉、膽固醇等相關(guān)輔料產(chǎn)品。A.V.T.專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系,是國(guó)內(nèi)藥企、高校、研究所等單位主要磷脂供應(yīng)商。
【合作品牌】我們的合作品牌包括日本丘比(kewpie)株式會(huì)社、日本精化(NFC)株式會(huì)社、瑞士CordenPharma等廠商,是相應(yīng)品牌在中國(guó)的代理商,全權(quán)負(fù)責(zé)中國(guó)境內(nèi)的產(chǎn)品銷(xiāo)售及技術(shù)支持與售后服務(wù)。