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HEPES緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn),所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有***的應(yīng)用,如可用于開(kāi)放式細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞的長(zhǎng)期觀察、RNA或DNA提取試劑盒中。其次,相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)。另外,HEPES緩沖溶液對(duì)鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明,HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。具體應(yīng)用方面,如鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液(Onivyde)。2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****藥物易安達(dá)(通用名:鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)正式批準(zhǔn),與5-氟尿嘧啶(5-FU)和亞葉酸(LV)聯(lián)合用于***接受吉西他濱***后進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性胰腺*患者。伊立替康脂質(zhì)體注射液作為一款轉(zhuǎn)移性胰腺****藥物,早前已在全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)獲批。更多信息詳見(jiàn)《易安達(dá)(鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)正式獲批!制劑***,發(fā)展歷程及市場(chǎng)前景深度分析》國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES。廣西高純度HEPES大批量采購(gòu)
緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的重要溶液,對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見(jiàn)的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷(簡(jiǎn)稱Tris)-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(簡(jiǎn)稱HEPES)緩沖溶液為例,介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。對(duì)于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等)而言,實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮比較好的***效果。在這些反應(yīng)過(guò)程中酸堿緩沖溶液經(jīng)常發(fā)揮著非常重要的作用。如人體血漿中存在NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等緩沖對(duì)構(gòu)成血漿的酸堿緩沖系統(tǒng),以維持正常人血漿的pH值在7.35~7.45。若血漿pH值低于7.35或者高于7.45則分別會(huì)引起酸中毒和堿中毒,危及生命。河北備案登記號(hào)HEPES實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)GMP條件下生產(chǎn)艾偉拓注射級(jí)HEPES。
生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng),生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖液都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。磷酸鹽:在有些實(shí)驗(yàn),它是酶的抑止劑或甚至是一個(gè)代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來(lái)。而且它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很小。三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點(diǎn)時(shí)溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris緩沖液,4℃時(shí)是8.4,37℃時(shí)是7.4,因此,4℃配制的緩沖液在37℃進(jìn)行測(cè)量時(shí),其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下,其緩沖能力極為不理想。
儲(chǔ)存方法:HEPES緩沖液在2-8℃下可保存1年。注意事項(xiàng):HEPES緩沖液運(yùn)輸時(shí)需要加冰袋。但儲(chǔ)存時(shí)避免冷凍,否則會(huì)有鹽類(lèi)物質(zhì)析出。N-三(羥甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一種兩性離子緩沖液,名字由Tris和glycine衍生而來(lái),結(jié)構(gòu)類(lèi)似于Tris,但是高濃度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”緩沖液之一,**初開(kāi)發(fā)用于提供葉綠體反應(yīng)的緩沖體系。Tricine的有效pH緩沖范圍為7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做電泳緩沖液,以及用來(lái)重懸細(xì)胞沉淀。Tricine具有低負(fù)電荷和高離子強(qiáng)度的特性,非常適用于電泳分離1~100kDa的低分子量蛋白?;谖灮鹣x(chóng)熒光素酶的ATP分析實(shí)驗(yàn)中,比較10種常見(jiàn)的緩沖液,Tricine(25mM)表現(xiàn)出比較好的檢測(cè)效果。另外,在自由基誘導(dǎo)的膜損傷實(shí)驗(yàn)中,Tricine還是一種有效的羥自由基清除劑。作者:泰安格林化工鏈接:AVT注射用HEPES的cas號(hào)是什么?
HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4攝氏度保存。國(guó)內(nèi)艾偉拓注射用HEPES已登記?廣西高純度HEPES大批量采購(gòu)
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外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染,其主要成分為HEPES,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,能有效控制pH在范圍,尤其在pH具有較好的緩沖能力,終濃度一般為mmol/L,培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達(dá)到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其**適pH值為,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜,Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過(guò)甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。廣西高純度HEPES大批量采購(gòu)
【關(guān)于我們】艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司AVT.是國(guó)內(nèi)一家專營(yíng)磷脂類(lèi)藥用輔料的科技公司,旗下產(chǎn)品覆蓋天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等細(xì)分領(lǐng)域,并提供諸如油酸、油酸鈉、膽固醇等相關(guān)輔料產(chǎn)品。A.V.T.專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系,是國(guó)內(nèi)藥企、高校、研究所等單位主要磷脂供應(yīng)商。
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