湖北蛋白質磷酸化修飾組學分析

泛素化修飾蛋白質組學：泛素是一種由76個氨基酸組成的多肽，在真核生物中高度保守，可通過異肽鍵與目標蛋白賴氨酸殘基的氨基進行共價連接。泛素化蛋白的富集主要基于標記，泛素用親和標簽（通常為6xHis）進行標記，并通過鎳螯合色譜親和提取泛素化蛋白。由于泛素的C端為Arg-Gly-Gly結構，經(jīng)胰蛋白酶水解后，Gly-Gly保留在修飾蛋白的肽鏈上，使肽的質量增加114，因此可作為泛素定位位點的質量標記。用HPLC對樣品進行預分離，使用針對特定殘留結構的抗體富集泛素化肽，可很大程度上提高泛素化蛋白的濃度。串聯(lián)質譜可以鑒定泛素化位點。蛋白質翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用。湖北蛋白質磷酸化修飾組學分析

蛋白質翻譯后修飾的重要性：翻譯后修飾可以發(fā)生在蛋白質生命周期的任何階段。例如，許多蛋白質在翻譯完成后不久就被修飾，以介導適當?shù)牡鞍踪|折疊或穩(wěn)定，或將新生蛋白質引導到不同的細胞區(qū)室（例如，細胞核、膜）。折疊和定位完成后發(fā)生其他修飾，以刺激或滅活催化活性或以其他方式影響蛋白質的生物活性。蛋白質也與靶向降解蛋白質的標簽共價連接。除了單一的修飾外，蛋白質通常還通過翻譯后切割和通過蛋白質成熟的分步機制增加功能基團的組合進行修飾。分析蛋白質及其翻譯后修飾對于心臟病、神經(jīng)退行性疾病和糖尿病的研究尤為重要。PTMs 的特征，雖然具有挑戰(zhàn)性，但提供了對病因學過程下的細胞功能的無價的洞察。在技術上，研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開發(fā)特異性的檢測和純化方法。幸運的是，這些技術障礙正在用各種新的和精煉的蛋白質組學技術來克服。武漢蛋白質乙?；揎椊M學主要技術蛋白質磷酸化修飾可應用于食品工業(yè)方面。

蛋白質翻譯后修飾組學：翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質進行共價加工的過程。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團，可以改變蛋白質的物理、化學性質，進而影響蛋白質的空間構象和活性狀態(tài)、亞細胞定位、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質-蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義，異常的翻譯后修飾會導致多種疾病的發(fā)生。質譜可以分辨蛋白質修飾前和修飾后分子量上的變化，因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進行鑒定和定量。

甲基化修飾蛋白質組學技術應用領域：基礎醫(yī)學、臨床診斷：生物標志物，疾病機理機制，疾病分型，個性化治理等；生物醫(yī)藥：藥物作用機理，藥效評價，藥物開發(fā)等；農(nóng)林領域：抗逆脅迫機制，生長發(fā)育機制，育種保護研究等；畜牧業(yè)：肉類及乳品質研究，致病機理研究等；微生物領域：致病機理，耐藥機制，病原體-宿主相互作用研究等；海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等。技術優(yōu)勢：采用抗體，特異性高；鑒定通量高， 一次可檢測高可達上千個甲基化修飾位點。蛋白質翻譯后修飾有什么生物學意義？

泛素化修飾蛋白質組學有些什么？泛素化可以生產(chǎn)出單泛素化或多泛素化蛋白質。后者在當7個賴氨酸殘基的泛素與另一個泛素的甘氨酸C端連接形成。這種泛素分子鏈接在生物過程中起到重要的作用。共價結合泛素的蛋白質能被蛋白酶識別并降解，這是細胞內(nèi)短壽命蛋白質和一些異常蛋白降解的普遍途徑。泛素化及類泛素化蛋白在細胞分裂，自噬，DNA修復，免疫應答，細胞消亡等方面同樣起到關鍵作用。與消化道內(nèi)進行的蛋白質水解不同，從泛素與蛋白的結合到將蛋白水解成小的肽段，整個水解過程需要能量參與。人們開始意識到泛素-蛋白酶系統(tǒng)是一個對于真核細胞非常重要的調節(jié)系統(tǒng)。蛋白質翻譯后修飾 (PTMs) 進一步促進了從基因組水平到蛋白質組復雜性的增加。磷酸化修飾蛋白質組學主要技術

泛素化修飾蛋白組學是一種重要的翻譯后修飾。湖北蛋白質磷酸化修飾組學分析

乙?；揎椀鞍捉M學應用方向有什么？1、基礎醫(yī)學、臨床診斷：生物標志物，疾病機理機制，疾病分型，個性化治理等；2、生物醫(yī)藥：藥物作用機理，藥效評價，藥物開發(fā)等；3、微生物領域：致病機理，耐藥機制，病原體-宿主相互作用研究等；4、海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等；5、生物能源、環(huán)境科學領域：發(fā)酵過程優(yōu)化，生物燃料生產(chǎn)，環(huán)境危定風險評估研究等；6、食品營養(yǎng)：食品儲藏及加工條件優(yōu)化，食品組分及品質鑒定，功能性食品開發(fā)，食品安全監(jiān)檢測等。湖北蛋白質磷酸化修飾組學分析