哈爾濱蛋白質翻譯后修飾組學主要方式

來源: 發(fā)布時間:2022-05-17

翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。蛋白質翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質添加磷酸酯、乙酸酯、酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質降解、信號傳導和調節(jié)過程、基因表達調節(jié)以及蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞硝基化、甲基化、乙酰化、脂質化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。蛋白質修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性,包括蛋白質折疊、活性以及之后的功能。哈爾濱蛋白質翻譯后修飾組學主要方式

泛素化修飾PRM定量驗證:原理: 泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質的活性和定位,調控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內(nèi)的多種細胞活動。首先對泛素化的蛋白進行胰酶消化,在賴氨酸的修飾位點上會產(chǎn)生兩個甘氨酸的殘基(K-GG),利用對泛素化賴氨酸(K-GG)具有高親和力的基序抗體,特異性富集復雜樣本中的泛素化肽段,結合LC-MS/MS蛋白質定量方法,實現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質定性定量分析。深圳蛋白質亞硝基化修飾組學分析價格蛋白質翻譯后修飾組學是通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,可以改變蛋白質的物理、化學性質。

泛素化修飾蛋白質組學有些什么?泛素化可以生產(chǎn)出單泛素化或多泛素化蛋白質。后者在當7個賴氨酸殘基的泛素與另一個泛素的甘氨酸C端連接形成。這種泛素分子鏈接在生物過程中起到重要的作用。共價結合泛素的蛋白質能被蛋白酶識別并降解,這是細胞內(nèi)短壽命蛋白質和一些異常蛋白降解的普遍途徑。泛素化及類泛素化蛋白在細胞分裂,自噬,DNA修復,免疫應答,細胞消亡等方面同樣起到關鍵作用。與消化道內(nèi)進行的蛋白質水解不同,從泛素與蛋白的結合到將蛋白水解成小的肽段,整個水解過程需要能量參與。人們開始意識到泛素-蛋白酶系統(tǒng)是一個對于真核細胞非常重要的調節(jié)系統(tǒng)。

蛋白質翻譯后修飾組學產(chǎn)品:常規(guī)的蛋白質組學研究往往只關注不同生理、病理條件下蛋白質表達水平的變化。然而,越來越多的研究發(fā)現(xiàn),許多重要的生命活動、疾病發(fā)生不僅與蛋白質的豐度相關,更重要的是被各類蛋白質翻譯后修飾所調控。因此深入研究蛋白質翻譯后修飾對揭示生命活動的機理、篩選疾病的臨床標志物、鑒定藥物靶點等方面都具有重要意義。由于翻譯后修飾的蛋白質在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,質譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度。質譜可以分辨蛋白質修飾前和修飾后分子量上的變化。

定量N-糖基化蛋白質翻譯修飾組學:蛋白質的N-糖基化位點修飾是重要的蛋白質翻譯后修飾之一,主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。蛋白質的N-糖基化修飾位點具有保守的氨基酸序列NX(S/T)(其中X為除脯氨酸以外的其它氨基酸)凝集素親和法是目前糖蛋白質組學中應用普遍的分離富集方法。凝集素(lectin)是一類糖結合蛋白質,能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合,它們與糖鏈可逆非共價結合,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。泛素化修飾蛋白質組學有些什么?蛋白質亞硝基化修飾組學費用

蛋白質翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,泛素化,亞硝基化,甲基化,乙?;?,脂質化和蛋白水解。哈爾濱蛋白質翻譯后修飾組學主要方式

根據(jù)不同的作用位點,蛋白質乙酰化修飾分為:發(fā)生在蛋白N端的乙?;揎?、發(fā)生在蛋白賴氨酸上的乙?;揎?。前者發(fā)生在90%以上的真核生物新生蛋白上,對于新生蛋白的成熟和細胞定位非常重要,由N乙酰轉移酶(NATs)負責;而后者是一個可逆的過程,主要由賴氨酸乙?;福↘ATs)和賴氨酸去乙酰化酶(KDACs),賴氨酸的乙?;揎検俏覀兡壳把芯康闹攸c。蛋白質磷酸化修飾應用領域:應用在食品工業(yè)方面,通過人工翻譯磷酸化修飾的蛋白可以普遍用于各種食用蛋白質的改性,以改善蛋白質品質。如,花生蛋白、大豆蛋白、小麥面筋蛋白等。在人工磷酸化修飾的方法下,也可以研究各種蛋白質的功能和相關代謝途徑的調控。在醫(yī)學領域,蛋白質的磷酸化紊亂,會導致細胞周期調控異常,因此,病理的形成與蛋白質的磷酸化異常也有很大相關性。其分子機制問題對于病癥等重大疾病的研究具有相當?shù)闹笇б饬x,這也是指當之無愧地成為生物學研究領域中的熱點。哈爾濱蛋白質翻譯后修飾組學主要方式