深圳mRNA-seq轉錄組學分析鑒定

來源: 發(fā)布時間:2022-05-12

RNA-seq轉錄組學技術優(yōu)勢有:1、可以直接測定每個轉錄本片段序列、單核苷酸分辨率的準確度;2、靈敏度高,可以檢測細胞中少至幾個拷貝的稀有轉錄本;3、可以對任意物種進行全基因組分析,能夠檢測未知基因,發(fā)現(xiàn)新的轉錄本,并準確地識別可變剪切位點及cSNP,UTR區(qū)域;4、檢測范圍廣,能夠同時鑒定和定量稀有轉錄本和正常轉錄本。RNA-seq轉錄組學是需要生物學重復的,至少需要兩次生物學重復,3次以上的生物學重復更好。以3個重復為例,加上對照的三個生物學重復,一次RNA-seq需要6個樣本。轉錄學組測序是目前深入研究轉錄組復雜性的強大工具。深圳mRNA-seq轉錄組學分析鑒定

宏轉錄學組概念:宏轉錄組測序是對某一特定時期、特定環(huán)境樣品中的全部微生物的RNA進行高通量測序,直接獲得該環(huán)境中所有微生物轉錄組信息的一種測序技術的新應用。宏轉錄組中不只包含有微生物的物種信息,還有微生物的基因表達信息。如果說宏基因組能告訴我們微生物群,那么宏轉錄組則能告訴我們這些微生物,這有助于挖掘微生物功能基因和探索微生物與環(huán)境、疾病、動植物等關系的機制。宏轉錄組分析:從以G為單位的高通量測序數(shù)據(jù)中獲取研究所需的微生物種類、基因、通路等信息是進行宏轉錄組研究必須經歷的一步?,F(xiàn)在網絡上分析組學數(shù)據(jù)的工具五花八門。能否從眾多組學工具中選擇出適合分析宏轉錄組數(shù)據(jù)的軟件,能否搭建一套完整、快速、高效、靈敏、高精確的宏轉錄組分析pipline,直接關乎到后期數(shù)據(jù)分析的進行。深圳mRNA-seq轉錄組學分析鑒定轉錄組學是研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態(tài)下所轉錄出所有 RNA 的學科。

什么叫轉錄組轉錄組學?1、轉錄組,廣義上指某一生理條件下,細胞內所有轉錄產物的組合,包括信使RNA、核糖體RNA、轉運RNA及非編碼RNA;狹義上指所有mRNA的組合。2、轉錄組學,是指一門在整體水平上研究細胞中基因轉錄的情況及轉錄調控規(guī)律的學科。轉錄組學是從RNA水平研究基因表達的情況。轉錄組即一個活細胞所能轉錄出來的所有RNA的總和,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。以DNA為模板合成RNA的轉錄過程是基因表達的第一步,也是基因表達調控的關鍵環(huán)節(jié)。

轉錄組學測序流程:1、樣品RNA準備。2、測序文庫構建。3、DNA成簇(Cluster)擴增。4、高通量測序(Illumina)。5、數(shù)據(jù)分析。轉錄組的分析大致有以下幾種情況:1、同一物種在發(fā)育過程中的各時間節(jié)點的基因表達特點及存在的差異;2、不同品系之間存在的差異表達基因;3、不同的外界條件處理,如細菌、病毒、光照、紫外、干旱、高溫、高鹽脅迫,對基因表達的影響;轉錄組(transcriptome),是指特定生長階段某組織或細胞內所有轉錄產物的匯合,狹義上指所有mRNA的匯合。轉錄組學檢測范圍廣,高于6個數(shù)量級的動態(tài)檢測范圍。

轉錄組學技術路線及研究意義:轉錄組測序的研究對象為特定細胞在某一功能狀態(tài)下所能轉錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA。相對于傳統(tǒng)的芯片雜交平臺,轉錄組測序無需預先針對已知序列設計探針,即可對任意物種的整體轉錄活動進行檢測,提供更準確的數(shù)字化信號,更高的檢測通量以及更普遍的檢測范圍,是目前深入研究轉錄組復雜性的強大工具?;诟咄繙y序平臺的轉錄組測序技術能夠全方面獲得物種特定組織的轉錄本信息,從而進行基因表達水平研究、新轉錄本發(fā)現(xiàn)研究、轉錄本結構變異研究等。普通轉錄組學測序適用于哪些情況?湖北靶向轉錄組學質譜鑒定

轉錄組學有高通量、更精確的數(shù)字信號。深圳mRNA-seq轉錄組學分析鑒定

RNA-Seq,是基于新一代測序技術的轉錄組學研究方法:首先提取生物樣品的全部轉錄的RNA并進行mRNA富集,然后反轉錄為cDNA后進行的新一代高通量測序,在此基礎上進行片段的拼接組裝,從而可得到一個個的轉錄本,進而可以形成對該生物樣品當前發(fā)育狀態(tài)的基因表達狀況的全局了解。不同階段或部位的生物樣品的RNA-Seq轉錄組進行比較分析,則可以在轉錄層面得到基因表達水平的變化,針對關鍵基因則可以進行代謝通路(Pathway)的構建。轉錄組學即特定細胞在某一功能狀態(tài)下轉錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA。深圳mRNA-seq轉錄組學分析鑒定