河南泛素化修飾蛋白質組學主要技術

泛素化修飾蛋白質組技術原理：首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物，然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度，然后通過高質量的泛素化修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進行富集，之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質譜中進行分析定量。技術優(yōu)勢：1、高特異性的修飾類泛抗體；2、高分辨率、高靈敏度質譜儀；應用領域：泛素化修飾還參與了細胞周期、增殖、細胞凋亡、分化、轉錄調控、基因表達、轉錄調節(jié)、信號傳遞、損傷修復、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調控。泛素化心血管等疾病的發(fā)病密切相關。因此，作為近年來生物化學研究的一個重大成果，它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。蛋白質翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用。河南泛素化修飾蛋白質組學主要技術

蛋白質糖基化修飾組學技術服務：糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發(fā)生于內質網(wǎng)和高爾基體等部位。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基共價結合。蛋白質經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節(jié)蛋白質功能作用。凝素親和法是目前糖蛋白質組學中應用比較普遍的分離富集方法。凝集素（lectin）是一類糖結合蛋白質，能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合，它們與糖鏈可逆非共價結合，糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后，通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。上海磷酸化修飾蛋白質組學主要技術蛋白質磷酸化修飾的免疫印跡技術優(yōu)點：能夠特異鑒定單個磷酸化位點。

甲基化修飾蛋白質組學技術原理：目前用于甲基化蛋白質組分析的甲基化肽段富集抗體分為精氨酸甲基化（Me-R）抗體和賴氨酸甲基化（Me-K）抗體兩大類。根據(jù)氨基酸殘基上所含甲基化修飾基團數(shù)量的不同，精氨酸甲基化（Me-R）抗體又包括：單甲基化精氨酸（MMA）抗體、非對稱二甲基化精氨酸（ADMA）抗體和對稱二甲基化精氨酸（SDMA）抗體；賴氨酸甲基化（Me-K）抗體又包括：賴氨酸單甲基化（K-Me）抗體、賴氨酸二甲基化（K-2Me）抗體和賴氨酸三甲基化（K-3Me）抗體。其中，Me-R的各類抗體需要單獨使用，而Me-K抗體可以混合使用。

蛋白質翻譯后修飾組學：翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質進行共價加工的過程。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團，可以改變蛋白質的物理、化學性質，進而影響蛋白質的空間構象和活性狀態(tài)、亞細胞定位、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質-蛋白質相互作用。蛋白質翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義，異常的翻譯后修飾會導致多種疾病的發(fā)生。質譜可以分辨蛋白質修飾前和修飾后分子量上的變化，因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進行鑒定和定量。蛋白質修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性，包括蛋白質折疊、活性以及之后的功能。

定量磷酸化蛋白質翻譯修飾組學：蛋白質發(fā)生磷酸化是重要的翻譯后修飾，它與信號傳導、細胞周期、生長發(fā)育機理等諸多生物學問題有密切關系。研究蛋白質磷酸化對闡明蛋白質功能具有重要意義。將磷酸化肽段TiO2富集技術和iTRAQ/TMT/Lable free技術相結合，實現(xiàn)對磷酸化蛋白質組學的定量研究。技術原理：在磷酸化肽段富集前先進行 iTRAQ/TMT 標記，然后通過 TiO2 富集方法獲得高純度的磷酸化肽段，之后結合高分辨率質譜完成對樣品的定量分析。蛋白質翻譯后修飾有什么生物學意義？貴州蛋白質琥珀?；揎椊M學質譜鑒定

磷酸化修飾蛋白質組學是原核生物和真核生物中比較重要的調控修飾形式。河南泛素化修飾蛋白質組學主要技術

琥珀酰化修飾蛋白質組技術特點：采用主流抗體親和富集方法，特異性高，富集效率好；通過高分辨率、高掃描速度的質譜，對富集的琥珀?；亩芜M行大規(guī)模鑒定；結合常用的定量技術可對不同樣品間的琥珀酰化水平差異進行定量比較。適用范圍：藥物作用靶點研究；疾病標志物篩選；植物脅迫/抗逆研究；作用機制研究；要求物種具有蛋白質參考數(shù)據(jù)庫、EST序列（轉錄組）或基因組注釋信息。應用方向：線粒體代謝、生物合成與代謝、中心代謝途徑、炎癥與疾病。河南泛素化修飾蛋白質組學主要技術