上海乙?;揎椀鞍踪|組學質譜鑒定

來源: 發(fā)布時間:2022-03-21

蛋白翻譯后修飾組學技術在準確醫(yī)學中的應用:盡管目前大數(shù)據的獲得會采用基因組學和轉錄組學,但是關鍵的發(fā)現(xiàn)還是依賴蛋白質組數(shù)據而得到的。近來越來越多的研究表明蛋白組學驅動的準確的醫(yī)學具有極大的實用性和普適性,蛋白組學的研究更加速了臨床轉化的進程。蛋白翻譯后修飾(post-ranslational modification, PTM)賦予了蛋白種類的豐富性及蛋白功能的多樣化,研究蛋白翻譯后修飾不只可以確定蛋白修飾(磷酸化、泛素化、?;⒓谆?、SUMO化等)或蛋白酶裂解的新位點,還可以發(fā)現(xiàn)生物標記物及探索藥物/化學調節(jié)物的作用機制。蛋白質磷酸化修飾鑒定方法有免疫印跡技術。上海乙?;揎椀鞍踪|組學質譜鑒定

蛋白翻譯后修飾:蛋白質氨基酸序列的特定位置可以與化學基團或者小分子量的蛋白共價結合從而發(fā)生蛋白質翻譯后修飾(post-translational modifications,PTMs)。翻譯后修飾是蛋白質生物合成的一個步驟,翻譯后多肽鏈在成為成熟的蛋白質產品之前要經過修飾,PTMs的類型包括磷酸化、乙?;?、糖基化、泛素化和二硫鍵等等,它導致蛋白質組復雜性的大幅增加。對于任何給定的蛋白質,各種各樣的PTMs提供了一種通過改變蛋白質的結構和功能來促進細胞快速變化的方法。PTMs在信號轉導、蛋白質穩(wěn)定性和周轉率、蛋白質與蛋白質識別和相互作用以及空間定位中起著至關重要的作用。濟南蛋白質糖基化修飾組學有哪些質譜是蛋白質翻譯后修飾檢測的常用技術之一。

蛋白質學組翻譯后修飾的研究策略:目前,有幾種分析蛋白質翻譯后修飾的策略,包括質譜(MS)、Eastern blotting、放射性標記和Western blotting。放射性標記和Western blotting是比較傳統(tǒng)、特異性和相對定量的方法。該過程需要事先知道翻譯后修飾類型。局限性包括抗體的特異性和可用性。質譜技術也常被用于翻譯后修飾分析,不受修飾類型和相關修飾位點的現(xiàn)有知識的限制。自下而上:自下而上的技術是蛋白質組學研究中使用的質譜策略之一。在根據序列鑒定肽之前,需要使用蛋白酶消化蛋白質。由于該技術不能保證在檢測過程中被檢測肽的完整性和穩(wěn)定性,因此無法獲得不同蛋白質翻譯后修飾之間關系的信息,這意味著它無法檢測到某些修飾。因此,該方法不適用于分析組蛋白的組合翻譯后修飾。

蛋白磷酸化修飾過程:蛋白磷酸化修飾這一過程是通過蛋白激酶催化,將磷酸基團從ATP轉移到多肽底物的絲氨酸、蘇氨酸,或酪氨酸殘基上。并且磷酸化修飾的過程是可逆的,去磷酸化反應由蛋白磷酸酶催化完成。蛋白磷酸化檢測方法:Western Blot檢測方法:Western Blot是檢測蛋白磷酸化水平的常用方法,主要過程為先利用SDS-PAGE分離蛋白質,隨后將蛋白質轉移到PVDF膜上,然后使用特異性識別磷酸化蛋白的抗體來鑒定目標蛋白的磷酸化水平。只有被磷酸化修飾的蛋白才會在相應分子質量的地方顯現(xiàn)特異性蛋白條帶。蛋白質乙?;揎椊M學技術對細胞核內轉錄調控因子的刺激有著重要的作用。

蛋白質-蛋白質相互作用是蛋白質發(fā)揮功能的主要機制之一,在DNA損傷修復,自噬和代謝等過程中都扮演著非常重要的角色,蛋白相互作用異常便會導致疾病的發(fā)生.在蛋白質的賴氨酸,絲氨酸和蘇氨酸等氨基酸殘基上,可發(fā)生甲基化,乙?;?磷酸化和泛素化等200多種翻譯后修飾,這些修飾通常能改變蛋白質的電性,疏水性和空間結構等屬性,為與之結合的蛋白提供結合的錨定或產生位阻效應,像一把開關在時空上精確調控蛋白質-蛋白質相互作用的發(fā)生以及動態(tài)變化.結構研究表明,蛋白質之間的相互作用通常由臨近的幾個氨基酸殘基直接結合,替換該區(qū)域的氨基酸殘基,通常能破壞結合,使其失去部分功能或酶活性,可以針對性地開發(fā)和設計抑制劑,用于疾病的診療。蛋白磷酸化修飾過程是通過蛋白激酶催化,將磷酸基團從ATP轉移到多肽底物的絲氨酸、或酪氨酸殘基上。上海丙二?;揎椀鞍踪|組學類型

各種蛋白質翻譯后修飾在信號通路和網絡中發(fā)揮著重要的作用。上海乙?;揎椀鞍踪|組學質譜鑒定

乙?;揎椀鞍踪|組學分析:乙?;揎椀鞍踪|組學分析是指從蛋白質組學的水平分析蛋白質乙?;揎?,包括乙酰化蛋白質的鑒定和定量。提供基于質譜的乙酰化蛋白組研究服務。蛋白質乙?;ńM蛋白乙酰化和非組蛋白乙?;?。組蛋白乙?;饕琴嚢彼嵋阴;言诨蜣D錄調控作用方面被普遍的研究。非組蛋白乙?;瘶嫵闪瞬溉閯游锛毎幸阴;鞍椎闹饕糠?,參與了所有主要生物過程,包括蛋白質的定位、轉移、功能和降解,遺傳物質的轉錄和復制等。除了重要的生物學功能以外,乙酰化蛋白質及其調控酶還與衰老和多種疾?。ㄈ缟窠涀冃挝蓙y、心血管疾病等)緊密相關。因此,對乙?;揎椀鞍踪|組進行研究有助于進一步探索細胞的生命活動與了解相關疾病的發(fā)病機制。上海乙?;揎椀鞍踪|組學質譜鑒定

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