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蛋白質翻譯后修飾:蛋白質的翻譯后修飾通過可逆的共價鍵將小分子或蛋白質與底物蛋白質上特定的氨基酸結合,調控著底物的酶活性、功能以及三級結構的變化。各種蛋白質翻譯后修飾在信號通路和網(wǎng)絡中發(fā)揮著重要的作用,翻譯后修飾系統(tǒng)的紊亂將導致一系列疾病的發(fā)生。通過實驗的方法鑒定蛋白質翻譯后修飾的位點需要耗費大量的資金和時間,并且酶反應的優(yōu)化常常難以實現(xiàn)。而計算的方法則能夠快速、準確的預測酶特異性的底物蛋白質及其修飾位點。蛋白質翻譯后修飾組學磷酸化修飾具有簡單的特性。深圳氧化修飾蛋白質組學質譜分析
蛋白磷酸化修飾過程:蛋白磷酸化修飾這一過程是通過蛋白激酶催化,將磷酸基團從ATP轉移到多肽底物的絲氨酸、蘇氨酸,或酪氨酸殘基上。并且磷酸化修飾的過程是可逆的,去磷酸化反應由蛋白磷酸酶催化完成。蛋白磷酸化檢測方法:Western Blot檢測方法:Western Blot是檢測蛋白磷酸化水平的常用方法,主要過程為先利用SDS-PAGE分離蛋白質,隨后將蛋白質轉移到PVDF膜上,然后使用特異性識別磷酸化蛋白的抗體來鑒定目標蛋白的磷酸化水平。只有被磷酸化修飾的蛋白才會在相應分子質量的地方顯現(xiàn)特異性蛋白條帶。貴陽蛋白質磷酸化修飾組學研究蛋白質磷酸化修飾組學具有全方面性。
乙酰化修飾蛋白質組學分析:乙?;揎椀鞍踪|組學分析是指從蛋白質組學的水平分析蛋白質乙酰化修飾,包括乙酰化蛋白質的鑒定和定量。提供基于質譜的乙?;鞍捉M研究服務。蛋白質乙酰化包括組蛋白乙?;头墙M蛋白乙酰化。組蛋白乙?;饕琴嚢彼嵋阴;?,已在基因轉錄調控作用方面被普遍的研究。非組蛋白乙?;瘶嫵闪瞬溉閯游锛毎幸阴;鞍椎闹饕糠?,參與了所有主要生物過程,包括蛋白質的定位、轉移、功能和降解,遺傳物質的轉錄和復制等。除了重要的生物學功能以外,乙?;鞍踪|及其調控酶還與衰老和多種疾病(如神經(jīng)變形紊亂、心血管疾病等)緊密相關。因此,對乙?;揎椀鞍踪|組進行研究有助于進一步探索細胞的生命活動與了解相關疾病的發(fā)病機制。
蛋白質修飾位點分析:基于LC-MS/MS分析能夠精確測定蛋白質或多肽分子質量這一特性,從而檢測蛋白質或者多肽上位點發(fā)生何種修飾??蓹z測修飾類型如下: 磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙?;?、丁?;?、丙二?;⑽於;㈢牾;?、單甲基化、二甲基化、三甲基化。1、磷酸化:信號轉導、細胞周期、生長發(fā)育機理等;2、糖基化:蛋白質折疊、更新以及免疫應答等;3、乙?;夯虮磉_調控、細胞凋亡、細胞代謝、蛋白質穩(wěn)定性以及神經(jīng)退行性的病變等;4、泛素化:細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA修復以及信號轉導等;5、甲基化:染色質結構及轉錄調控等;6、丙?;?/ 丙二酰化 / 戊二?;?/ 琥珀酰化:主要存在于線粒體和細菌中,與代謝過程密切相關。蛋白質翻譯后修飾有什么生物學意義?
蛋白質乙?;揎椊M學技術:乙酰化修飾是體內保守的可逆轉的蛋白修飾,對細胞核內轉錄調控因子的刺激有著重要的作用。此外,還存在的非組蛋白乙酰化修飾參與了代謝通路及代謝酶活性的調節(jié)。采用肽段預分離降低高豐度組蛋白對蛋白乙?;b定的影響,再結合免疫共沉淀通過抗體富集乙?;碾亩危瑥亩鴮崿F(xiàn)乙?;蔫b定及定量。樣品要求:1、SDS-PAGE條帶:5個以上可見考染條帶。2、溶液(目標蛋白質):目標蛋白總量>50μg,目標蛋白濃度>80%。3、溶液(大規(guī)?;旌系鞍踪|):蛋白總量>1mg,蛋白濃度>1μg/μl。蛋白質翻譯后修飾組學磷酸化修飾具有可逆的特性。貴陽蛋白質磷酸化修飾組學研究
蛋白質翻譯后修飾可以改變蛋白質的物理、化學性質。深圳氧化修飾蛋白質組學質譜分析
蛋白質翻譯后修飾在蛋白質中磷酸化位點分析時應該注意些什么問題?覆蓋率:覆蓋率越高,檢測和鑒定含有修飾基團的肽幾率就越大。修飾位點的占有率:被修飾的蛋白質的百分比低,則檢測到修飾肽的機會會隨之減少。如果百分比較高(> 30%),則有助于識別修飾位點。棕櫚?;鞍仔揎椯|譜鑒定方法:S-棕櫚酰化的主要功能是促進蛋白質與細胞膜的結合。蛋白質可以由一個棕櫚?;M成,也可以與更多棕櫚基或與其他脂質,如豆蔻酰基。由于對S-棕櫚酰化蛋白分析仍然具有挑戰(zhàn)性,由于S-棕櫚?;揎椀鞍讈喫揭约笆杷院蜐撛诓环€(wěn)定的硫代質鏈的S-脂?;摹,F(xiàn)在常用的幾種方法可以捕獲S-脂?;鞍滓约皩δ繕诵揎椀鞍走M行捕獲。深圳氧化修飾蛋白質組學質譜分析
上海拜譜生物科技有限公司是一家從事生物科技、醫(yī)療科技、化工科技和檢測科技領域內的技術開發(fā),技術轉讓,技術咨詢,技術服務,軟件開發(fā),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學品,監(jiān)控化學品,煙花爆竹,民用物,易制毒化學品)、儀器儀表的銷售。。。....的公司,是一家集研發(fā)、設計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。公司自創(chuàng)立以來,投身于多組學服務,質譜檢測,蛋白質組學,代謝組學,是商務服務的主力軍。拜譜生物繼續(xù)堅定不移地走高質量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關鍵領域,實現(xiàn)轉型再突破。拜譜生物始終關注商務服務市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。