南京計算機輔助精子分析STR

人類精子冷凍保存和儲存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲存；對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序；所有儲罐都應有液位監(jiān)控報警系統(tǒng)，以監(jiān)測溫度和液氮液位，傳感器應連接警報器，可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。計算機輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測方法，確保檢測過程的準確性和可靠性?。南京計算機輔助精子分析STR

采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳，采精前用溫水將雙手、**，尤其是**洗凈。可采用**法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序，開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹，伴有大量精子，***部分來自精囊，故應收集整份精液，不要遺漏任何部分，尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈、無菌、干燥，采精前容器的溫度應與室溫相同；瓶子不應過大，但瓶口不應過小，以免將精液射出瓶外；還應貼上標簽，記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫，放置在貼身內(nèi)衣袋中，不可傾斜或倒置，盡可能在1小時內(nèi)送到實驗室。快速運動精子分析精子動力分析男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses，CASA)。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。

精液常規(guī)是精液常規(guī)檢查的簡稱；是泌尿外科、男科、生殖科簡便普及的化驗室檢查方法之一。也是婦科經(jīng)常參考使用的重要參數(shù)之一。

精液由精子和精漿組成，其中精子占10%，其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質(zhì)和脂肪外，還含有多種酶類和無機鹽。精液中含有鋅元素。精子精液是由睪丸產(chǎn)生的。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產(chǎn)生。精漿里含有果糖和蛋白質(zhì)，是精子的營養(yǎng)物質(zhì)。另外，精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質(zhì)。 正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無色，每毫升為精液中的精子數(shù)一般在6千萬至2億個。有活動能力的精子占總數(shù)的60%以上?；尉討倲?shù)的10%以下。在室溫下精子活動力持續(xù)3－4小時。精液是堿性，女性生殖器內(nèi)部則為酸性。因此，精液進入女性內(nèi)部，就會被中和。 精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數(shù)。

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實驗室，任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數(shù)板的方法，但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運動精子非常重要。因此，關于精子活力分級，第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調(diào)，精子形態(tài)學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結(jié)局的預后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液，應單獨計算并在報告中注明；傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準確率有待提高。馬精子分析

CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響，提高了檢測的客觀性和可重復性?。南京計算機輔助精子分析STR

CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài)，可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常，還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù)，以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。

與人工操作相比，自動化系統(tǒng)更具客觀性，精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5]，這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比（Z%），和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的，而且沒有顯示臨界值；高于臨界值，妊娠率也不會進一步增加[7]。 南京計算機輔助精子分析STR