如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清,或胚胎干細胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存血清?需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。我們的胎牛血清采用可持續(xù)的生產(chǎn)方式,符合環(huán)保要求。南京新生牛血清廠家
血清的作用1.提供基本營養(yǎng)物質(zhì),如維生素、氨基酸等。2.提供激丨素和各種生長因子,如胰島素、類固醇激丨素等。3.提供結(jié)合蛋白,如血小板,表皮生長因子等。4.提供促接觸和伸展因子,使細胞貼壁免受機械損傷。5.對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。血清使用中的常見問題1.保存血清好的辦法?建議保存在-5℃至-20℃。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.如何解凍血清,才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?建議將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但需要注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。3.血清解凍后,發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有很多原因,很普遍的原因是血清中脂蛋白的變性造成的。纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后也會存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一,但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若想去除絮狀沉淀物,可將血清分裝至無菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。廣州馬血清購買我們的胎牛血清經(jīng)過嚴格的質(zhì)控,確保產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。
儲存條件-20°C凍存。胎牛血清頭次解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完,用量頻率少推薦使用EvaCell免分裝50ml的規(guī)格哦血清和培養(yǎng)基的配制,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則,保證更好的細胞培養(yǎng)效果。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分和被污染,影響血清品質(zhì)。血清融化注意:在水浴過程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中盡量不要產(chǎn)生泡沫!胎牛血清使用說明血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混勻,制備成新鮮完全培養(yǎng)基(整個操作需在無菌超凈臺中進行,注意無菌操作)。配制好的完全培養(yǎng)基推薦在4℃保存,應(yīng)在1周內(nèi)用完。
1.血清的保存在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數(shù)周,不宜室溫保存,不宜反復(fù)凍融。配制成完全培養(yǎng)基后應(yīng)在四周內(nèi)用完,一瓶血清如無法一次用完應(yīng)無菌分裝成恰當(dāng)數(shù)量并冷凍保存。2.血清中的絮狀沉淀物血清是多種蛋白質(zhì)的混合物,在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質(zhì)量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成完全培養(yǎng)基再過濾即可使用。3.血清的解凍合理的解凍方式可以更好的保護血清質(zhì)量并可以在很大程度上減少絮狀沉淀物的產(chǎn)生。血清從低溫冰箱中取出后,經(jīng)4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解,直至完全融解后再使用。豬血清的價格相對較低,與其他動物血清相比具有較高的性價比。
由于血清來源于動物,且含有細胞培養(yǎng)中所需的各種營養(yǎng)(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激丨素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養(yǎng)實驗中普遍的試劑的基礎(chǔ)。目前血清采集地主要分布在以下國家:市面上的牛血清產(chǎn)品名稱雖然五花八門,但根據(jù)其不同的特性,追其根本,大致可分為以下四種。根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分:胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采集血得來的血清。國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的新生牛,有時還稱作國產(chǎn)新生牛血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)指的是出生14天-3個月進行取血的牛血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,簡稱ABS)指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛血清。以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。我們的胎牛血清經(jīng)過嚴格的檢測,確保不含任何有害物質(zhì)。湖南雞血清哪里有賣
胎牛血清能夠提供豐富的營養(yǎng),促進細胞的快速生長和分裂。南京新生牛血清廠家
牛胎球蛋白的作用牛胎球蛋白是一種糖蛋白,它含多肽74%,己糖8.3%,氨基己糖5.5%,唾液酸8.7%,分子量為48.4kDa。牛胎球蛋白是由肝細胞分泌,體內(nèi)有抑制胰蛋白酶活性,也是成骨作用的抑制劑。在體外試驗中,牛胎球蛋白具有促進細胞貼壁、生長和分化的活性,可選擇性誘導(dǎo)某些細胞程序性死亡,增強人巨噬細胞的吞噬作用。有研究發(fā)現(xiàn),腫瘤細胞在無血清培養(yǎng)基中需要10個小時才能在塑料器皿上貼壁,而加入胎球蛋白后只需要2小時。懸浮細胞可內(nèi)吞攝取胎球蛋白,細胞內(nèi)鈣離子升高,促使外泌體從細胞內(nèi)分泌出來,從而介導(dǎo)細胞黏附。胎球蛋白是脊椎動物的血漿蛋白,具有高度同源性,在爬行動物、魚、鳥、有袋類動物和哺乳動物中大量存在。它也是胎牛血清中豐富的球蛋白。南京新生牛血清廠家