由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備，投資少，對設(shè)備要求簡單，對蒸汽的要求也比較低，且**效果可靠，因此，間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。（三）、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義：連續(xù)**也叫連消，將配制好的并經(jīng)預(yù)熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內(nèi)達(dá)到**溫度（126～132℃）。然后進(jìn)入維持罐（或維持管），使在**溫度下維持3～7分鐘后再進(jìn)入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進(jìn)入已事先**（空罐**）過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達(dá)到～MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時，需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前，直接用蒸汽進(jìn)行空罐**（空消），用無菌空氣保壓，待培養(yǎng)基流入罐后，開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式，其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程：（1）由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高，經(jīng)維持段保溫一定時間后，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進(jìn)行冷卻。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用。江蘇培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)

    附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上，哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖，a：無菌苗在培養(yǎng)基中生長情況；b：無菌苗蓮座葉及根系發(fā)育；c：萌發(fā)率；d主根長度；a和b中bar＝；圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上，蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)的對比效果圖，a：無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況；b：無菌植株地上部分及根系發(fā)育；c：無菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右)；d：主根長度；e：株高；f：蓮座葉長度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上，油菜無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖，a：無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況；b：無菌苗地上部分及根系發(fā)育；c：莖高；d：莖中粗；e：主根長；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上，馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖，a：無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況；b：無菌苗地上部分及根系發(fā)育；c：莖高；d：莖中粗；e：根數(shù)；a和b中bar＝；圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上，哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖，a：葉片愈傷**；b：葉片愈傷**誘導(dǎo)率；c：根愈傷**；d：根愈傷**誘導(dǎo)率；a和c中bar＝；圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上。江蘇培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞實驗的可靠性和重復(fù)性。

    平衡鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）簡稱鹽溶液，集緩沖液的緩沖能力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體，兼具維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、同時供給細(xì)胞生存所必需的能量和無機(jī)離子成分的作用。各種BSS的緩沖系統(tǒng)有所不同，其中以Hank’s液和Earle’s液為例，它們主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的pH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會變堿，Hank’s液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存**，需要用Earle’s液，。如果**是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲存的**，用Hank’s液就可以了。表3-1幾種常用的平衡鹽溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成分，同時參與許多重要的細(xì)胞功能活動。但它們有使細(xì)胞凝集的作用，在配制分散細(xì)胞的消化液和特殊用途的細(xì)胞洗滌時，宜采用Ca2+、Mg2+含量較低的Dulbecco液或無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液，或者PBS液。概述基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。

    MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強(qiáng)于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細(xì)胞生長非�？鞎r，pH值通常下降得很快，此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。這時，可以通過以下幾種方法解決：1）增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在；2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液；3)適當(dāng)松開瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液，使終濃度為10~25mM；4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks’鹽配制的培養(yǎng)液；5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用*****。酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下，可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值，但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值，建議使用pH計進(jìn)行測定。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響，也可通過純化技術(shù)去除。無血清培養(yǎng)基提供了無血清的純凈環(huán)境。

    在工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75％酒精中消毒30s，用無菌水沖洗3～4次，使用白貓*白水和無菌水按1：4的體積比配制消毒液，將外植體放入消毒液浸泡40min。通過采用上述技術(shù)方案，這種方式對外植體消毒方法簡單，能夠**降低外植體的死亡率，消毒成活率較高。本發(fā)明在一較佳示例中可以進(jìn)一步配置為：在s1中，外植體選擇為**繡球的枝芽飽滿的半木質(zhì)化枝條莖尖部分。綜上所述，本發(fā)明包括以下至少一種有益技術(shù)效果：本發(fā)明通過液體**培養(yǎng)技術(shù)，以芽為原材料，獲取方便，增殖倍率高達(dá)8～10倍，生根率達(dá)到95％以上，苗木規(guī)格整齊，性狀保持穩(wěn)定，同時節(jié)省成本，適合工廠化大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量繡球種苗。附圖說明圖1是繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法的流程示意圖。具體實施方式以下結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。實施例：參照圖1，為本發(fā)明公開的一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法，具體步驟如下：(一)、試驗材料：供試材料采自江蘇東郁植物科技有限公司苗圃的**繡球，品種為無盡夏(endlesssummer“bloomstruck”)，外植體選用當(dāng)年生枝芽飽滿的半木質(zhì)化枝條莖尖部分。(二)、試驗方法：繡球**培養(yǎng)過程按以下步驟進(jìn)行：初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)。。MEM培養(yǎng)基提供了細(xì)胞生長所需的基本環(huán)境。重慶MEM a培養(yǎng)基代理商

無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞培養(yǎng)提供了更清晰的背景。江蘇培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)

    c、結(jié)果為：在用未調(diào)ph液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)時，整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基；在用ph調(diào)至，整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、；不論是否調(diào)ph至，cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基；不論是否調(diào)ph至，1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說明，1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應(yīng)用于植物水培時，不論是否調(diào)節(jié)ph至，均能獲得很好的培養(yǎng)效果，克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調(diào)節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點(diǎn)。**后說明的是，以上實施例*用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而其不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，則均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。江蘇培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)