青海DMEM/F12培養(yǎng)基 無(wú)錫億賽生物科技供應(yīng)

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發(fā)布時(shí)間:2024-10-25

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    從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱**及冷卻過(guò)程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)**流程要長(zhǎng)些,但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過(guò)程同時(shí)也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻,因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。(2)蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的**溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間**,**后的培養(yǎng)基通過(guò)一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重,同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出,避免了過(guò)熱或**不徹底等現(xiàn)象。(3)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括:①配料預(yù)熱罐,將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃,以避免連續(xù)**時(shí)由于料液與蒸汽溫度過(guò)大而產(chǎn)生水汽撞擊聲;②連消塔,連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和,并使料液的溫度很快升高到**溫度(126-132)℃;③維持罐,連消塔加熱的時(shí)間很短,光靠這段時(shí)間的**是不夠的,維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min,以達(dá)到**的目的;④冷卻管,從維持罐出來(lái)的料液要經(jīng)過(guò)冷卻排管進(jìn)行冷卻。F12培養(yǎng)基支持多種細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。青海DMEM/F12培養(yǎng)基

青海DMEM/F12培養(yǎng)基,培養(yǎng)基

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青海DMEM/F12培養(yǎng)基,培養(yǎng)基

    K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液,細(xì)胞內(nèi)K+對(duì)于***某些酶是必需的,并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細(xì)胞外液中的作用是將**內(nèi)部細(xì)胞之間相互粘著,在細(xì)胞內(nèi)參與許多重要的細(xì)胞生理活動(dòng),如傳導(dǎo)、參與肌肉細(xì)胞收縮等。在懸浮培養(yǎng)時(shí),為了減少細(xì)胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的重要成分,對(duì)于細(xì)胞間相互穩(wěn)定結(jié)合有很重要的意義。磷的化合物對(duì)細(xì)胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控有重要作用。其他成分:肽、核苷、嘌呤等。可幫助細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng)。分類低血清細(xì)胞培養(yǎng)基概述營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ),營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡,新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過(guò)化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,*需添加1%~5%新生牛血清,而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒(méi)有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之,如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素(recombinantinsulin)、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白(human(holo)tran-sferrin)以及牛血清白蛋白等,有些還包含一些生長(zhǎng)因子。

    如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長(zhǎng),對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境,一般指完全培養(yǎng)液,添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),如MEM培養(yǎng)基,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),即成乳漢(歐)液,再與化學(xué)合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用(如1:1)。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑(生長(zhǎng)因子等)模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、**酸及脂類等。減血清培養(yǎng)基減少了血清成分的變異性。

青海DMEM/F12培養(yǎng)基,培養(yǎng)基

    C)大腸埃希菌++--產(chǎn)氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗(yàn)對(duì)腸桿菌屬的鑒別試驗(yàn)傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗(yàn)-/+++++++---尿素酶試驗(yàn)--+--+乳糖發(fā)酵試驗(yàn)----++在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學(xué)物質(zhì)**不需要的**生長(zhǎng),利于需要的**分離,這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)等。美藍(lán)是氧化還原指示劑。例如,在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可**革蘭陽(yáng)性**,而利于革蘭陰性**的生長(zhǎng);如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽(yáng)性**生長(zhǎng),又能**許多革蘭陰性**生長(zhǎng),但傷寒沙門菌卻能在這個(gè)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗(yàn)中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧。減血清培養(yǎng)基減少了血清中的未知因素對(duì)細(xì)胞的影響。無(wú)血清培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)

RPMI1640培養(yǎng)基能夠提高細(xì)胞的存活率。青海DMEM/F12培養(yǎng)基

    以及無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基專門針對(duì)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),含有BSS、21種氨基酸、維生素等,***適于多種正常細(xì)胞和腫*細(xì)胞的培養(yǎng),也用做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。HamF12細(xì)胞培養(yǎng)基含微量元素,可在血清含量低時(shí)用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營(yíng)養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發(fā)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時(shí)必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。**普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對(duì)不同的動(dòng)物細(xì)胞,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個(gè)性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營(yíng)養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動(dòng)物來(lái)源成份對(duì)生物制品安全性的影響。(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免**污染造成的危害。青海DMEM/F12培養(yǎng)基

 

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