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根據本發(fā)明的結果還提供了與相關多肽的結構和序列有關的重要信息，這是以靶向方式產生具有所需修飾特性的其他多肽所必需的。特別地，可以定義所謂的“熱點”，即潛在地適合于通過引入靶向突變來修飾特性的序列區(qū)段。也可以推導出有關氨基酸序列位置的信息，在該區(qū)域中可以發(fā)生可能對活性幾乎沒有影響的突變，并且可以將其指定為潛在的“沉默突變”?！暗谋磉_”涵蓋“異源表達”和“過表達”，并且涉及的轉錄和mrna向蛋白質的翻譯。過表達是指在轉細胞或生物中，以mrna、多肽和/或酶活性水平測量的產物的產生超過了相似遺傳背景的非轉化細胞或生物中的產生水平。如本文所用，“表達載體”是指這樣一種分子，其使用分子生物學方法和重組dna技術工程化以將外來或外源dna遞送到宿主細胞中。
從而使兩個序列共價連接在一起。啟動子序列和待重組表達的序列之間的距離可以小于200個堿基對，或小于100個堿基對或小于50個堿基對。除啟動子和終止子外，還可以提及以下作為其他調控元件的例子：靶向序列，增強子，聚腺苷酸化信號，可選擇標記，擴增信號，復制起點等。
所述序列還可以是或部分合成的。不管來源如何，與啟動子序列有關的序列將根據在結合到本文實施方案的多肽后所連接的啟動子性質而表達或沉默。相關在所有時間或替代地在特定時間在整個生物體中或在特定組織、細胞或細胞室中可以編碼需要表達或抑制的蛋白。此種核苷酸序列特別地編碼將所需表型性狀賦予給由其改變或轉化的宿主細胞或生物體的蛋白質。更特別地，相關的核苷酸序列導致在細胞或生物體中產生如本文定義的一種或多種目的產物。特別地，核苷酸序列編碼具有如本文定義的酶活性的多肽。本文如上所述的核苷酸序列可以是“表達盒”的一部分。
有利地，諸如細菌、真菌或酵母的微生物被用作宿主生物。屬和種是非常特別優(yōu)選的。組中發(fā)現(xiàn)了其他有利的細菌。家族的酵母也是合適的宿主?；蛘?，整個植物或植物細胞可以用作天然或重組宿主。取決于宿主生物，根據本發(fā)明的方法中使用的生物以本領域技術人員已知的方式生長或培養(yǎng)。培養(yǎng)可以分批、半分批或連續(xù)進行。營養(yǎng)物可以在發(fā)酵開始時給予，也可以稍后，半連續(xù)或連續(xù)地提供。這也在下面更詳細地描述。本發(fā)明進一步涉及重組生產根據本發(fā)明的多肽或其功能性生物學活性片段的方法，其中培養(yǎng)產生多肽的微生物，可選地通過施加至少一種誘導表達的誘導劑來誘導多肽的表達，并從培養(yǎng)物中分離這些多肽。
氮源可以單獨使用或混合使用?？梢源嬖谟谂囵B(yǎng)基中的無機鹽化合物包括鈣，鎂，鈉，鈷，鉬，鉀，錳，鋅，銅和鐵的氯化物、磷或硫酸鹽。磷酸、磷酸氫鉀或磷酸氫鉀或相應的含鈉鹽可用作磷源?？梢詫Ⅱ蟿┨砑拥脚囵B(yǎng)基中，以將金屬離子保持在溶液中。特別合適的螯合劑包括基苯酚，例如兒茶酚或原兒茶酸酯，或有機酸，例如檸檬酸。生長因子和鹽通常源自復雜培養(yǎng)基的成分，例如酵母提取物，糖蜜，玉米漿等。